| 表达轮状病毒nsp4基因重组腺病毒的构建与免疫评价 |
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| 引用本文： | 谢 力 王晓囡 李 杨 严 敏 曹 颖 李鸿钧 孙茂盛. 表达轮状病毒nsp4基因重组腺病毒的构建与免疫评价[J]. 中国生物工程杂志, 2014, 34(2): 1-6. DOI: 10.13523/j.cb.20140201 |
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| 作者姓名： | 谢 力 王晓囡 李 杨 严 敏 曹 颖 李鸿钧 孙茂盛 |
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| 作者单位： | 1. 中国医学科学院/北京协和医学院 医学生物学研究所 云南省重大传染病疫苗研发重点实验室 昆明 650118;2. 昆明学院医学院 昆明 650214 |
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| 基金项目： | 国家科技重大专项资助项目（20132X10004002-003-05） |
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| 摘 要： | 目的：应用非复制腺病毒表达系统构建表达人轮状病毒非结构蛋白4（NSP4）的重组腺病毒，初步评价其免疫保护效果。方法：构建含野生轮状病毒NSP4基因的穿梭质粒pshuttle-NSP4，与腺病毒骨架质粒pAdeasy经同源重组后在Ad-293细胞中包装获得pAd-NSP4重组腺病毒颗粒。电镜、RT-PCR、免疫荧光等方法鉴定病毒特征及在体外细胞中的表达。肌肉注射及滴鼻方式免疫小鼠，检测小鼠血清抗体效价及其中和保护效果。结果：获得了滴度为108.25CCID50/ml的重组腺病毒pAd-NSP4，免疫荧光检测到特异性目的蛋白的表达。二次免疫后肌肉注射和滴鼻小鼠的ELISA血清平均效价分别为1：320 和1：1436.8；中和抗体效价1：45.3和1：71.8。结论：表达轮状病毒NSP4蛋白的非复制型重组腺病毒颗粒具有良好的免疫原性。滴鼻途径比肌肉注射可更加有效地诱导小鼠的免疫应答。
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| 关 键 词： | 轮状病毒 NSP4 重组腺病毒 |
| 收稿时间： | 2013-12-03 |
Construction and Immunogenicity of a Recombinant Adenovirus Expressing NSP4 of Group A Rotavirus |
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| XIE Li,WANG Xiao-nan,LI Yang,YAN Min,CAO Yin,LI Hong-jun,SUN Mao-sheng. Construction and Immunogenicity of a Recombinant Adenovirus Expressing NSP4 of Group A Rotavirus[J]. China Biotechnology, 2014, 34(2): 1-6. DOI: 10.13523/j.cb.20140201 |
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| Authors: | XIE Li WANG Xiao-nan LI Yang YAN Min CAO Yin LI Hong-jun SUN Mao-sheng |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Rotavirus NSP4 Recombinant adenovirus |
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