| 应用聚合酶链式反应快速特异鉴定假单胞菌和伯克霍尔德氏菌（R）-3-羟基酯酰载酯蛋白-辅酶A转酰基酶基因 |
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| 引用本文： | 郑重, 陈金春, 田鸿磊, 贝锋锋, 陈国强,.应用聚合酶链式反应快速特异鉴定假单胞菌和伯克霍尔德氏菌（R）-3-羟基酯酰载酯蛋白-辅酶A转酰基酶基因[J].生物工程学报,2005,21(1). |
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| 作者姓名： | 郑重 陈金春 田鸿磊 贝锋锋 陈国强 |
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| 作者单位： | 清华大学生物科学与技术系蛋白质科学教育部重点实验室; |
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| 摘 要： | 聚羟基脂肪酸酯 (PHA)是一类具有广泛应用前景的可降解生物塑料。因其可以以葡萄糖等廉价底物直接发酵生产PHA而日益受到重视。目前的研究表明在积累中长链PHA的假单胞菌中 ,由phaG基因编码的（R）3 羟基酯酰载酯蛋白 辅酶A转酰基酶 (PhaG)起关键作用 ,但目前为止对该蛋白还知之甚少。通过聚合酶链式反应 (PCR)建立了一种快速、特异鉴定phaG基因的方法 ,应用该方法成功地从两株积累不同PHA的假单胞菌Pseudomonasstutzeri 1317和Pseudomonasnitroreducens 080 2中分别克隆得到phaG基因 ,并在phaG基因突变株PseudomonasputidaPHAGN-21中表达成功。同时 ,还首次报道了从非假单胞菌菌株Burkholderiacaryophylli AS 1.274 1中鉴定得到phaG基因 ,提示PhaG介导的中长链PHA合成途径作为一种通用的代谢模式在细菌中广泛存在 ,为进一步实现从廉价的非相关底物合成中长链PHA提供了必要的分子生物学基础。
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| 关 键 词： | 聚羟基脂肪酸酯 （R）-3-羟基酯酰载酯蛋白辅酶A转酰基酶 聚合酶链式反应 PseudomonasstutzerI（施氏假单胞菌） Pseudomonasnitroreducens（硝基还原假单胞菌） Burkholderiacaryophylli（麝香石竹伯克霍尔德氏菌） |
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