| 特异性单引物PCR |
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| 引用本文： | 余升红. 特异性单引物PCR[J]. 生物技术, 2001, 11(6): 44-45 |
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| 作者姓名： | 余升红 |
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| 作者单位： | 广州中山医科大学遗传教研室, |
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| 摘 要： | 建立特异性单引物PCR，并用于筛选基因克隆重组子。根据α－globin的一段序列设计引物，按照设计好的特性单引物PCR扩增条有α－globin的重组质粒PLNSX－aglobin，具体扩增条件如下：（1）97℃5min变性后，94℃30s，70℃2min30s，30个循环，制备单链模板；（2）94℃1min，12℃5min，16℃3min，18℃3min，20℃3min，22℃3min，25℃1min，30℃3min，37℃3min，72℃6min，低温条件下引物3′端4－5个碱基与所扩单链模板退火配对，扩增得到一系列不同起始位点但同一序列末端长短一的核酸片段；（3）以上述所得片段为模版进行如下条件的扩增：94℃30min，70℃2min，70℃2min，72℃2min，每个循环增加1s），45个循环。结果，特异性单引物PCR能够从pLNSX－αglobin上扩增出特异带，可有效用于筛选基因克隆重组子。
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| 关 键 词： | 特异性单引物PCR 重组子 筛选 |
| 文章编号： | 1004-311X(2001)06-0044-02 |
| 修稿时间： | 2001-03-05 |
Specific one primer PCR |
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