| 不同异源启动子与MDVgB启动子及其复合启动子的活性比较 |
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| 引用本文： | 邱亚峰 葛菲菲 徐学清 陈溥言. 不同异源启动子与MDVgB启动子及其复合启动子的活性比较[J]. 微生物学报, 2006, 46(2): 314-317 |
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| 作者姓名： | 邱亚峰 葛菲菲 徐学清 陈溥言 |
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| 作者单位： | 南京农业大学动物疫病诊断与免疫重点实验室 南京210095 |
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| 基金项目： | 国家“863计划”(2002AA245051)~~ |
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| 摘 要： | 为了选择适宜的启动子调控外源基因的表达,以改善马立克氏病病毒为载体的重组病毒的免疫保护力。将hCMV立即早期启动子及增强子、SV40早晚期启动子及增强子或hCMV立即早期增强子的部分序列分别与马立克氏病病毒(MDV)自身的囊膜糖蛋白B基因(gB)启动子核心部分在体外杂合,分别构建复合启动子PhCMV-gB、PSV-gB或Pen-gB;将这些启动子与虫荧光素酶报告基因相连,构建表达载体。利用脂质体将以上质粒与内标质粒(pSV-β-LacZ)共转染鸡胚成纤维次代细胞,于转染后48h,将细胞刮下来,利用荧光素酶测定试剂盒和β-半乳糖苷酶测定试剂盒分别测定转染细胞的荧光素酶和β-半乳糖苷酶的活性,通过荧光素酶和β-半乳糖苷酶活性的比值获得虫荧光素酶的相对活性,利用虫荧光素酶的相对活性进行启动子的活性比较。结果表明,复合启动子相对马立克氏病病毒自身的gB启动子,活性有不同程度的提高,其中复合启动子PhCMV-gB的活性最高,而复合启动子PSV-gB和Pen-gB的活性相当;但与商业强启动子相比,复合启动子活性要弱一些或相当。因此,从某种意义上讲,这些复合启动子既具有gB启动子的一些特性,又有商业强启动子的一些特性,为以马立克氏病毒为载体的新兴疫苗的开发奠定了基础。
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| 关 键 词： | 马立克氏病病毒 复合启动子 虫荧光素酶 |
| 文章编号： | 0001-6209（2006）02-0314-04 |
| 收稿时间： | 2005-07-08 |
| 修稿时间： | 2005-11-29 |
Comparison of the relative luciferase activity in secondary CEF by different heterogenous strong promoters, MDV gB promoter and the composed promoters |
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| QIU Ya-feng, GE Fei-fei, XU Xue-qing, CHEN Pu-yan. Comparison of the relative luciferase activity in secondary CEF by different heterogenous strong promoters, MDV gB promoter and the composed promoters[J]. Acta microbiologica Sinica, 2006, 46(2): 314-317 |
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| Authors: | QIU Ya-feng GE Fei-fei XU Xue-qing CHEN Pu-yan |
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| Affiliation: | Key Laboratory of Animal Disease Diagnostic and immunology, Ministry of Agriculture, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Marek's disease virus Composed promoter Luciferase |
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