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抗人小细胞肺癌单克隆抗体的重链变区基因的体外扩增、克隆和序列分析
引用本文:刘健,吴文书,王斌,潘志美,田培坤,黄震宇,洪锦心. 抗人小细胞肺癌单克隆抗体的重链变区基因的体外扩增、克隆和序列分析[J]. 中国生物化学与分子生物学报, 1993, 9(1): 70-75
作者姓名:刘健  吴文书  王斌  潘志美  田培坤  黄震宇  洪锦心
作者单位:上海市肿瘤研究所免疫室,上海市肿瘤研究所免疫室,上海市肿瘤研究所免疫室,上海市肿瘤研究所免疫室,上海市肿瘤研究所免疫室,上海市肿瘤研究所免疫室,上海市肿瘤研究所免疫室 上海 200032,上海 200032,上海 200032,上海 200032,上海 200032,上海 200032,上海 200032
摘    要:本文从抗人小细胞肺癌单克隆抗体杂交瘤细胞中抽提总RNA,合成第一链cDNA,直接用PCR技术(polymerase chain reaction)扩增出351bp的重链变区基因(V_H),克隆至pUCV_(NP)-PCR载体上,经筛选得一批插入片段为351bp的阳性克隆,经核苷酸序列分析研究,证实已获得了该单克隆抗体的重链可变区基因。

关 键 词:聚合酶链反应  重链可变区基区  嵌合抗体  杂交瘤细胞  通用引物  
收稿时间:1993-02-20

Cloning and Sequencing of Immunoglobulin Heavy Variableregion Gene by Polymerase Chain Reaction
Liu,Jian Wu,Wen-shu Wang,Bin Pan,Zhi-mei Tian,Pei-kun Huang,Zhen-yu Hong,Jin-xin. Cloning and Sequencing of Immunoglobulin Heavy Variableregion Gene by Polymerase Chain Reaction[J]. Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology, 1993, 9(1): 70-75
Authors:Liu  Jian Wu  Wen-shu Wang  Bin Pan  Zhi-mei Tian  Pei-kun Huang  Zhen-yu Hong  Jin-xin
Affiliation:(Dept. of Immunol. and Cell Biol. Shanghai Cancer Institute, Shanghai 200032
Abstract:We have designed a set of oligonucleotide primers to amplify the cDNA of mouse immunoglobulin heavy variable-region gene by polymerase chain reaction. The primers incorporate restriction sites that allow the cDNA of the variable domain to be force-cloned for sequencing and expression. Here we have applied the technique to clone and sequence the heavy variable domain of monoclonal antibody that reacts with human small cell lung carcinoma line NCI H128. The result shows that the length of heavy variable-region gene of this antibody is 351 base pairs.
Keywords:Polymerase chain reaction  Immunoglobulin heavy variable-region gene  Chimeric antibody  Hybridoma  Universal primers  
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