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人GRY-RBP基因的表达及其RNA结合活性的初步鉴定
引用本文:杜光伟,陈建和,周严,汪俊华,黄晓玮,袁建刚,强伯勤. 人GRY-RBP基因的表达及其RNA结合活性的初步鉴定[J]. 中国生物化学与分子生物学报, 1999, 15(6): 866-870
作者姓名:杜光伟  陈建和  周严  汪俊华  黄晓玮  袁建刚  强伯勤
作者单位:中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室!北京100005,中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室!北京100005,中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室!北京100005,中
基金项目:国家科委863高科技计划,国家自然科学基金,国家攀登计划项目
摘    要:RRM RNA 结合蛋白在基因的转录后调控中起着重要作用.人GRY-RBP 是我们实验室最近克隆的一个新的全长cDNA,编码一个RRM RNA 结合蛋白.GRY-RBP 的全编码区用PCR扩增后,克隆到pET30a+ 表达载体中,在E.coli中获得了高效表达,表达的GRY-RBP重组蛋白占细菌总蛋白的21% .利用融合在GRY-RBPN 端的His.Tag,采取亲和层析的方法纯化了表达的重组蛋白.为了检测GRY-RBP的RNA 结合活性及其所结合的RNA 性质,将表达的蛋白与poly(A)-Sepharose 4B结合,发现GRY-RBP能与polyA (A)结合,结合活性能被可溶性的poly(A)、poly(C)减弱.改变NaCl浓度和加入不同浓度的酵母tRNA竞争物后,poly(A)结合活性不变.

关 键 词:RNA结合蛋白  原核表达  RNA结合活性  RNA同聚物  
收稿时间:1999-12-20

Expression of Human GRY-RBP and Analysis of its RNA Binding Activities
DU Guangwei,CHEN Jianhe,ZHOU Yan,WANG Junhua,HUANG Xiaowei,YUAN Jiangang,QIANG Boqin. Expression of Human GRY-RBP and Analysis of its RNA Binding Activities[J]. Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology, 1999, 15(6): 866-870
Authors:DU Guangwei  CHEN Jianhe  ZHOU Yan  WANG Junhua  HUANG Xiaowei  YUAN Jiangang  QIANG Boqin
Affiliation:(National Laboratory of Medical Molecular Biology,Institute of Basic Medical Sciences, Chinese Academy Medical Sciences & Peking Union Medical College,Beijing 100005
Abstract:
Keywords:RNA binding protein  Prokaryotic expression  RNA binding activity  RNA homopolymer
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