蚕豆叶绿体DNA BamH I克隆库的构建及含16S-25S rRNA基因克隆的分析

蚕豆叶绿体DNA(ct—DNA)经BamH I酶切产生26个片段，最大的为14．00kb，最小的为0．42kb。本文以pBR322为载体，E．Coli HB101为受体菌，采用标准分子克隆法构建了蚕豆ct—DNA BamH I克隆库，并从库中分离得到含叶绿体rRNA基因的克隆。32P标记的E．Coil 16S、23S rRNA能和蚕豆ct—DNA BamH I第6(B₆，5．65kb)和第9(B₉，4．70kb)个片段杂交，含有这二个片段的克隆分别命名为pVFB32和pVFBl6。利用几种限制性内切酶酶切和Southern印迹法构建了pVFBl6的物理图谱。pVFBl6电镜下观察到有一变性环(A—T丰富区)，经Hind I酶切，电镜观察定位此A—T丰富区位于16S和23S rRNA基因的间隔顺序内，推测该环可能与DNA复制有关。