| 进口竹荚鱼中单核细胞增生李斯特菌的鉴定及其鞭毛蛋白的原核表达 |
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| 引用本文： | 李正义,贾俊涛,曾静,魏海燕,姜英辉,崔鹤. 进口竹荚鱼中单核细胞增生李斯特菌的鉴定及其鞭毛蛋白的原核表达[J]. 微生物学通报, 2014, 41(6): 1160-1167 |
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| 作者姓名： | 李正义 贾俊涛 曾静 魏海燕 姜英辉 崔鹤 |
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| 作者单位： | 1. 山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心 山东 青岛 266002;1. 山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心 山东 青岛 266002;2. 北京出入境检验检疫局检验检疫技术中心 北京 100026;2. 北京出入境检验检疫局检验检疫技术中心 北京 100026;1. 山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心 山东 青岛 266002;1. 山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心 山东 青岛 266002 |
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| 基金项目： | 质检总局公益资助项目(No. 201110034) |
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| 摘 要： | 【目的】对进口竹荚鱼中分离的一株病原菌S1-2进行鉴定,并在大肠杆菌中表达其鞭毛蛋白。【方法】采用全自动微生物鉴定仪和革兰氏阳性菌鉴定卡进行生理生化反应测试,利用iap基因实时荧光PCR特异性扩增检测病原菌。通过PCR技术扩增病原菌S1-2的鞭毛蛋白flaA基因,克隆筛选和测序鉴定后,构建该基因的原核表达质粒pET22b-flaA,镍柱法纯化表达产物,通过免疫印迹鉴定其免疫原性。【结果】分离病原菌为革兰氏阳性菌,生理生化特征与单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes)的相似性为99%,协同溶血实验在靠近金黄色葡萄球菌的接种端溶血增强。SDS-PAGE结果表明融合表达产物分子量约为32 kD,Western blot结果表明重组表达的鞭毛蛋白具有免疫原性。【结论】flaA基因的原核表达为制备单核细胞增生李斯特菌的单克隆抗体及其检测方法的建立奠定了基础。
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| 关 键 词： | 竹荚鱼，单增李斯特菌，鉴定，鞭毛蛋白，表达 |
Identification of Listeria monocytogenes from imported Trachurus japonicas and prokaryotic expression of flagellin |
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| LI Zheng-Yi,JIA Jun-Tao,ZENG Jing,WEI Hai-Yan,JIANG Ying-Hui and CUI He. Identification of Listeria monocytogenes from imported Trachurus japonicas and prokaryotic expression of flagellin[J]. Microbiology China, 2014, 41(6): 1160-1167 |
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| Authors: | LI Zheng-Yi JIA Jun-Tao ZENG Jing WEI Hai-Yan JIANG Ying-Hui CUI He |
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| Affiliation: | 1. Technology Center for Shandong Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Qingdao, Shandong 266002, China;1. Technology Center for Shandong Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Qingdao, Shandong 266002, China;2. Technology Center for Beijing Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Beijing 100026, China;2. Technology Center for Beijing Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Beijing 100026, China;1. Technology Center for Shandong Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Qingdao, Shandong 266002, China;1. Technology Center for Shandong Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Qingdao, Shandong 266002, China |
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