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ES细胞体外定向分化为成熟肝细胞的实验研究
引用本文:胡安斌,蔡继业,郑启昌,洪岸,何晓青,戴云,单于,潘运龙,李凌松. ES细胞体外定向分化为成熟肝细胞的实验研究[J]. 生物化学与生物物理进展, 2004, 31(6): 518-522
作者姓名:胡安斌  蔡继业  郑启昌  洪岸  何晓青  戴云  单于  潘运龙  李凌松
作者单位:1. 暨南大学生命科学院,广州,510632;华中科技大学同济医学院附属协和医院肝胆外科中心,武汉,430022
2. 暨南大学生命科学院,广州,510632
3. 华中科技大学同济医学院附属协和医院肝胆外科中心,武汉,430022
4. 中山大学医学院,广州,510080
5. 暨南大学生命科学院,广州,510632;北京大学干细胞研究中心,北京,100083
基金项目:国家重点基础研究发展规划项目(973)(2001CB510101)和国家自然科学基金(重点项目30230350;面上项目60278014)资助.
摘    要:探讨了肝细胞在胚胎干细胞(ES cell)体外诱导分化系统中成熟分化的条件、机制及其鉴定方法.利用TGF, bFGF、HGF等细胞生长因子进行BALB/c小鼠ES细胞向肝细胞方向的定向诱导.利用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫细胞化学(ICC)和放射免疫法(RIA)动态检测肝细胞特异性基因和蛋白AFP,ALB,G6P,TAT,CK8, CK18等在培养体系中的表达,并测定肝细胞的尿素合成功能,最后测定肝细胞分化率.结果,肝细胞特异基因AFP, ALB,G6P和TAT最早分别于第3、9、11、13天表达,肝细胞特异蛋白AFP,CK8,CK18和ALB最早分别于第7、9、9和11天开始表达.第12天开始检测到尿素出现,浓度为8.3 μmol/L,并随培养时间延长而浓度逐渐增加.最后,测得生长因子诱导组肝细胞的分化率为32%,对照组肝细胞分化率为8%.说明肝细胞可以在ES细胞体外诱导分化系统中出现并成熟分化,bFGF、HGF、OSM等可以明显提高细胞分化率和成熟度,有望成为解决肝功能替代疗法中细胞来源问题的新希望.

关 键 词:胚胎干细胞,肝细胞,定向分化
收稿时间:2003-11-24
修稿时间:2004-02-25

Mature Hepatocytes Obtained in ES Cells Directional Differentiation System In vitro
HU An-Bin,CAI Ji-Ye,ZHENG Qi-Chang,HONG An,HE Xiao-Qing,DAI Yun,SHAN Yu,PAN Yun-Long and LI Ling-Song. Mature Hepatocytes Obtained in ES Cells Directional Differentiation System In vitro[J]. Progress In Biochemistry and Biophysics, 2004, 31(6): 518-522
Authors:HU An-Bin  CAI Ji-Ye  ZHENG Qi-Chang  HONG An  HE Xiao-Qing  DAI Yun  SHAN Yu  PAN Yun-Long  LI Ling-Song
Affiliation:College of Life Science and Technology, Jinan University, Guangzhou 510632, China;Department of General Surgery, Union Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430022, China;College of Life Science and Technology, Jinan University, Guangzhou 510632, China;Department of General Surgery, Union Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430022, China;College of Life Science and Technology, Jinan University, Guangzhou 510632, China;College of Life Science and Technology, Jinan University, Guangzhou 510632, China;College of Life Science and Technology, Jinan University, Guangzhou 510632, China;Medical College of Sun Yat-Sen University, Guangzhou 510080, China;College of Life Science and Technology, Jinan University, Guangzhou 510632, China;College of Life Science and Technology, Jinan University, Guangzhou 510632, China;Stem Cell Research Center, Peking University, Beijing 100083, China
Abstract:
Keywords:ES cells   hepatocytes   differentiation
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