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应用PCR法对小麦叶疫病菌的检测
引用本文:张 雁,张祥林,王 翀,罗 明,马海波,张 瑜. 应用PCR法对小麦叶疫病菌的检测[J]. 生物安全学报, 2015, 24(1): 72-77
作者姓名:张 雁  张祥林  王 翀  罗 明  马海波  张 瑜
作者单位:新疆出入境检验检疫局;新疆农业大学农学院
基金项目:国家质检公益性行业科研专项(201310091)
摘    要:【背景】小麦叶疫病菌于20世纪60年代入侵我国后,迅速传播扩散并在局部区域造成严重危害,对我国小麦的健康发展构成了巨大威胁。【方法】设计出检测小麦叶疫病菌的特异性引物,建立快速检测该病菌的PCR方法。用真菌通用引物ITS4/ITS5对小麦叶疫病菌进行PCR扩增,将扩增产物进行克隆和测序,使用DNAMAN软件设计出检测该病菌的特异性引物LJY1和LJY2,优化PCR反应体系。【结果】建立了该病菌的PCR检测方法,PCR反应体系:25 mmol·L-1Mg Cl22.5μL,10 mmol·L-1d NTP 1.0μL,10μmol·L-1引物各0.5μL,DNA模板8 ng,最佳退火温度57.6℃。【结论与意义】该方法可以准确地将小麦叶疫病菌与其他链格孢属的真菌区分开。本研究结果为小麦叶疫病的快速检测提供了依据,能够有效防止该病菌在小麦进出口贸易中传入我国。

关 键 词:小麦叶疫病菌  PCR  体系优化  引物LJY1和LJY2

Detection of Alternaria triticina Prasada & Prabhu using PCR techniques
Yan ZHANG,Xiang-lin ZHANG,Chong WANG,Ming LUO,Hai-bo MA and Yu ZHANG. Detection of Alternaria triticina Prasada & Prabhu using PCR techniques[J]. Journal of Biosafety, 2015, 24(1): 72-77
Authors:Yan ZHANG  Xiang-lin ZHANG  Chong WANG  Ming LUO  Hai-bo MA  Yu ZHANG
Affiliation:Yan ZHANG;Xiang-lin ZHANG;Chong WANG;Ming LUO;Hai-bo MA;Yu ZHANG;Xinjiang Entry and Exit Inspection and Quarantine Bureau;College of Agronomy,Xinjiang Agricultural University;
Abstract:
Keywords:Alternaria triticina   PCR   system optimization   primers LJY1 and LJY2
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