| 人可溶性血管内皮细胞生长因子受体Flt-1基因在链霉菌中的克隆表达 |
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| 引用本文： | 姜自彬,李元.人可溶性血管内皮细胞生长因子受体Flt-1基因在链霉菌中的克隆表达[J].微生物学报,2002,42(4):411-417. |
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| 作者姓名： | 姜自彬 李元 |
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| 作者单位： | 中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术研究所 北京100050
(姜自彬)，中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术研究所 北京100050(李元) |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 ( 30 0 70 0 2 3)~~ |
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| 摘 要： | 应用RT－PCR技术，从人脐静脉内皮细胞中扩增出编码人可溶性血管内皮细胞生长因子（VEGF）受体Flt-1胞外区前四个结构域的基因片段，亚克隆至pUC18质粒进行测序，将目的基因片段连接至链霉菌表达载体pSGLgpp，获得重组质粒pSGLgpp-F，将其转化至Streptomyces lividans TK24，获得基因工程菌株Sreptomyces lividans(pSGLgpp-F),对其培养上清液进行SDS－PAGE及Western blot分析，结果显示，在63．6kD处有特异性条带出现，表明sFLT-1在链霉菌中获得了成功表达，受体配基结合实验显示表达产物与VEGF可特异性结合，表明其具有配基结合生物活性。
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| 关 键 词： | 人可溶性血管内皮细胞生长因子受体 Flt－1 链霉菌 可溶性VEGF受体 基因表达 基因克隆 |
| 文章编号： | 0001-6209(2002)04-0411-07 |
Cloning and Expression of VEGF Receptor Flt-1 Gene in S.lividans TK24 |
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| Jiang Zibin\ Li Yuan.Cloning and Expression of VEGF Receptor Flt-1 Gene in S.lividans TK24[J].Acta Microbiologica Sinica,2002,42(4):411-417. |
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| Authors: | Jiang Zibin\ Li Yuan |
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| Institution: | Institute of Medicinal Biotechnology, Peking Union Medical College, Chinese Academy of Medical Science, Beijing 100050, China. |
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| Abstract: | Using RNA extracted from human umbilical vein endothelium cell as a template,the gene VEGF receptor Flt\|1 was amplified by RT\|PCR.Recombinant plasmid pSGLgpp\|F was constructed and was transformed into S.lividans TK24.With the detection of SDS\|PAGE and Western blot,a specific band being same to the reports near 63.6kd was found.The results showed sFlt\|1 was successfully expressed in S.lividans .The result of the binding assay of receptor\|ligand for sFlt\|1 showed sFlt\|1 has the biological activity of binding with its ligand VEGF. |
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| Keywords: | Soluble VEGF receptor Flt\|1 S lividans Gene expression |
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