黄瓜花叶病毒CP基因原核表达及抗血清的制备 |
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引用本文: | 秦云霞,曾华金,刘志昕,田娥. 黄瓜花叶病毒CP基因原核表达及抗血清的制备[J]. 中国生物工程杂志, 2004, 24(8): 73-76 |
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作者姓名: | 秦云霞 曾华金 刘志昕 田娥 |
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作者单位: | 中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室, 海口 571101 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目 ( 3 0 0 60 0 5 0 ) |
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摘 要: | 把黄瓜花叶病毒 (CMV)西番莲分离物的外壳蛋白 (CP)基因 ,通过BamHI SacI位点定向插入pET 2 2b( )载体 ,转化大肠杆菌BL2 1 (DE3)中 ,经IPTG诱导下 37℃培养 6h ,SDS PAGE电泳示表达蛋白分子质量为 31 8kDa ,表达量占菌体总蛋白的 2 8 9%,表明该蛋白得到了高效表达。用冰冷的氯化钾溶液显色 ,用表达的特异蛋白质条带制备抗原 ,免疫家兔制备出病毒特异抗血清。采用ID ELISA测定抗血清效价为 1 0 -6;抗血清和CMV几个分离物均有特异反应 ,和TMV、菌体蛋白不发生非特异性反应 ;检测病毒灵敏度达 30ng ml,能够从稀释 31 2 5倍的感病植物汁液中检测出病毒
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关 键 词: | 黄瓜花叶病毒 外壳蛋白 原核表达 酶联免疫吸附试验 |
收稿时间: | 2004-03-05 |
修稿时间: | 2004-03-05 |
Efficient Expression of Coat Protein Gene of Cucumber Mosaic Virus and Preparation of Viral-specific Antiserum |
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Abstract: | |
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Keywords: | Cucumber mosaic virus Coat protein Prokaryotic expression ELISA |
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