Nucleostemin在大鼠骨髓基质干细胞向成骨细胞诱导分化中的研究

目的探讨Nucleostemin（NS）在大鼠骨髓基质干细胞向成骨细胞诱导分化中的机制及作用。方法取4～6周龄雄性SD大鼠两侧股骨、胫骨骨髓基质细胞，原代及传代培养。取第3代骨髓间充质干细胞分别用普通和矿化培养基培养，通过相差倒置显微镜观察细胞生长、MTT法检测细胞增殖、碱性磷酸酶和茜素红钙染色了解成骨活性。免疫组化SABC法及免疫荧光法检测NS在细胞中的表达情况，比较NS分别在普通培养基和成骨细胞诱导培养基作用下的表达情况。结果大鼠骨髓间充质干细胞在矿化培养基诱导下其NS的表达较普通培养基培养下的表达明显减弱，且呈时间依赖性衰减。成骨细胞的NS表达则为阴性。在矿化液作用下，骨髓间充质干细胞可诱导为成骨细胞。MTT显示矿化液培养细胞生长潜伏期长，对数生长期较对照组延长。结论NS作为核干细胞因子，在干细胞中和某些肿瘤细胞中表达丰富。细胞分化后，其表达明显减少。因此，NS很可能作为大鼠基质干细胞是否具有潜在分化能力的标志性因子。