| 重组原核质粒GST-hTudor-SN-SN（1～4）的构建及表达 |
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| 作者姓名： | 苏超 朱梦瑜 高星杰 王鑫廷 张桂敏 付晓 葛林 杨洁 |
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| 作者单位： | [1]国家教育部免疫微环境与疫病重点实验室,天津市300070 [2]天津市细胞与分子免疫学重点实验室,天津市300070 [3]天津医科大学基础医学研究中心,免疫学教研室天津市300070 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划资助项目（863计划） （No.2007AA02Z115）,国家自然科学基金（No.30670441,30970562,30670802,30811130394.30911130165,30970582）,天津巿科委国际合作项目（No.07JCZDJC07300）,国家自然科学基金重大研究计划项目（No.90919032）.国家教育部高等学校博士学科点专项科研基金（No.20091202110001,天津市教委重点项目（No.2008ZD01） |
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| 摘 要： | 目的 将人类Tudor-SN（tudor staphylococcal nuelease）蛋白SN（1～4）基因片段分别定向连入pGEX-4T-1质粒,使Tudor-SN蛋白sN各功能片段与（;＂蛋白在大肠埃希菌BL21细胞内融合表达.方法 以重组质粒pSG5-Tudor-SN-flag为模板,PCR法扩增出目的 基因,利用EcoR Ⅰ和Sal Ⅰ双酶切法将目的 片段连接纠pGEX-4T-1载体卜,再将构建成功的GST-hTudor-SN-SN（1～4）重组质粒转化人大肠埃希菌BL-21内,IPTG诱导表达后再以考马斯亮蓝染色法检测GST融合蛋白的表达.结果 以单/双酶切和基因测序法鉴定构建的重组质粒均无误,考马斯亮监染色法观察到GST融合蛋白的正确表达.结论 重组原核GST.hTudor-SN-SN（1-4）质粒成功构建和表达.
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| 关 键 词： | 人类Tudor-SN蛋白 pGEX-4T-1 重组质粒 融合蛋白 |
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