| 鼠OAZ1基因的真核表达质粒的构建及其在COS7细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 刘梦瑶,韩钰,蔡富强,何玲,王艳林.鼠OAZ1基因的真核表达质粒的构建及其在COS7细胞中的表达[J].生物技术通报,2010(9). |
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| 作者姓名： | 刘梦瑶 韩钰 蔡富强 何玲 王艳林 |
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| 作者单位： | 三峡大学医学院,三峡大学分子生物学研究所,宜昌,443002 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 |
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| 摘 要： | 构建鼠OAZ1基因真核表达质粒,观察OAZ1-GFP融合蛋白在绿猴肾细胞COS7中的表达。利用RT-PCR的方法获得鼠OAZ1基因,再利用重叠延伸PCR缺失掉OAZ1序列中的205位碱基T,由此获得无需阅读框移码即可编码全长OAZ1的突变基因。将此突变基因克隆入真核表达载体pEGFP-N1获得重组质粒pEGFP-N1-OAZ1-T。将此质粒瞬时转染COS7后,采用RT-PCR,Western blotting,免疫荧光技术观察检测目的基因的表达情况。结果显示,酶切和测序证明质粒pEG-FP-N1-OAZ1-T构建正确,转染COS7细胞后,OAZ1-GFP融合蛋白能在细胞中高效表达。成功构建了pEGFP-N1-OAZ1-T真核表达质粒,在COS7细胞内,该质粒能成功指导OAZ1-GFP融合蛋白合成。
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| 关 键 词： | 多胺代谢 融合蛋白 真核表达 |
Construction and Expression of Recombinant OAZ1 Eukaryotic Plasmid in COS7 Cells |
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| Liu Mengyao,Han Yu,Cai Fuqiang,He Ling,Wang Yanlin.Construction and Expression of Recombinant OAZ1 Eukaryotic Plasmid in COS7 Cells[J].Biotechnology Bulletin,2010(9). |
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| Authors: | Liu Mengyao Han Yu Cai Fuqiang He Ling Wang Yanlin |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | OAZ |
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