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重组蛋白G基因工程菌高密度发酵及其分离纯化
作者姓名:张虎成  张征田  杨国伟  王晓杰  范海涛  杨军
作者单位:张虎成 (北京电子科技职业学院生物工程学院,北京,100029); 张征田 (南阳师范学院生命科学与技术学院,南阳,473061); 杨国伟 (北京电子科技职业学院生物工程学院,北京,100029); 王晓杰 (北京电子科技职业学院生物工程学院,北京,100029); 范海涛 (北京电子科技职业学院生物工程学院,北京,100029); 杨军 (北京电子科技职业学院生物工程学院,北京,100029);
基金项目:北京市科技计划面上项目(项目编号:KM201000002004)北京市属市管高等学校人才强教深化项目(项目编号:PXM2012_014306_000051)
摘    要:蛋白G是链球菌细胞壁蛋白,能和哺乳免疫球蛋白结合,在分离抗体研究方面具有重要的作用。重组蛋白G(SPG)基因重组工程菌高密度发酵工艺和SPG分离纯化研究工艺直接影响了蛋白G的应用。通过一级、二级种子培养,转接到发酵罐及控制补料浓度、加入IPTG等条件,考察了接种量、氧气、pH、培养方式等发酵工艺,以及超声破碎菌体、镍柱亲和层析、Sephadex G-25凝胶过滤层析和DEAE-FF离子交换层析分离提取SPG工艺,并用SDS-PAGE检测分离提取效果。高密度发酵能得到至少80g/L的菌体,最高达到150g/L的菌体,每升发酵液可得到1g的SPG。本生产工艺可得到高浓度和高产量的SPG。

关 键 词:高密度发酵  分离纯化  SPG
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