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| 兔肝金属硫蛋白β结构域的制备和鉴定 | |
| 作者姓名： | 于静 周妍娇 茹炳根 |
| 作者单位： | 北京大学蛋白质工程与植物基因工程国家实验室 |
| 摘 要： | 制备一定量的Ｃｄ、Ｚｎ兔肝金属硫蛋白（ｍｅｔａｌｏｔｈｉｏｎｅｉｎ，ＭＴ），然后脱掉其中的金属，获得不含金属的硫蛋白（ａｐｏＭＴ）．用一价金属ＣｕＣｌ或ＡｇＮＯ３以５．８１的金属蛋白摩尔比与ａｐｏＭＴ结合，将其β结构域用金属饱和，在３７℃，ｐＨ７．０下用枯草杆菌蛋白酶水解掉未结合金属的α结构域，获得Ｃｕ（Ⅰ）、Ａｇ（Ⅰ）结合的兔肝ＭＴ－Ｉ、ＭＴ－Ⅱ的β结构域．通过ＨＰＬＣ、羧甲基化后的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、氨基酸组成分析、金属定量、Ｎ末端分析和紫外扫描等鉴定，证明确实得到了Ｎ末端为Ｍｅｔ，分子量３０００左右，金属蛋白摩尔比为５～５．５１的ＭＴβ结构域，其氨基酸组成与理论值基本相符 |
| 关 键 词： | 金属硫蛋白（metalothionein） β结构域 枯草杆菌蛋白酶 |
| 收稿时间： | 1997-08-20 |
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