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产赭曲霉毒素A黑曲霉的PCR法检测
引用本文:张健,王小霞,朱柳杨,高强,高慧梅,张颖.产赭曲霉毒素A黑曲霉的PCR法检测[J].微生物学通报,2016,43(11):2530-2538.
作者姓名:张健  王小霞  朱柳杨  高强  高慧梅  张颖
作者单位:1. 工业发酵微生物教育部重点实验室 天津科技大学生物工程学院 天津 300457;2. 天津实发中科百奥工业生物技术有限公司 天津 300462,1. 工业发酵微生物教育部重点实验室 天津科技大学生物工程学院 天津 300457,1. 工业发酵微生物教育部重点实验室 天津科技大学生物工程学院 天津 300457,1. 工业发酵微生物教育部重点实验室 天津科技大学生物工程学院 天津 300457,2. 天津实发中科百奥工业生物技术有限公司 天津 300462,3. 食品营养与安全教育部重点实验室 天津科技大学食品工程与生物技术学院 天津 300457
基金项目:天津市企业博士后创新项目择优资助计划资助项目(2015);天津市资助选派优秀博士后国际化培养计划资助项目(2014);国家自然科学基金项目(No. 31471725,31370075,31201354)
摘    要:【目的】快速检测产赭曲霉毒素A(OTA)的黑曲霉。【方法】根据黑曲霉(Aspergillus niger)CBS513.88中An15g07920基因编码聚酮合酶的酰基转移酶(AT)域设计引物,建立针对产OTA黑曲霉的聚合酶链式反应(PCR)检测方法。【结果】对72株曲霉属菌株(黑曲霉、炭黑曲霉、赭曲霉、佩特曲霉、寄生曲霉和塔宾曲霉)进行检测,发现产OTA的黑曲霉能够扩增出特异性条带,而产OTA的其它菌株不能扩增出条带;检测出3株假阳性的产OTA黑曲霉,实时定量PCR分析此3株菌中An15g07920的同源基因表达情况,发现在产毒条件下可正常表达,排除了因基因无法表达导致假阳性的可能。本方法的检测灵敏度为25 pg的DNA含量,在污染所试农产品孢子浓度大于4.0×10~4–4.0×10~5个/g时可有效检测出产毒菌株。【结论】本方法虽会产生4%的假阳性结果,但是仍可作为产毒黑曲霉有效的快速检测方法,并在农产品污染产毒黑曲霉时进行有效预警。

关 键 词:赭曲霉毒素A,黑曲霉,聚合酶链式反应,检测

PCR detection of Aspergillus niger producing ochratoxin A
ZHANG Jian,WANG Xiao-Xi,ZHU Liu-Yang,GAO Qiang,GAO Hui-Mei and ZHANG Ying.PCR detection of Aspergillus niger producing ochratoxin A[J].Microbiology,2016,43(11):2530-2538.
Authors:ZHANG Jian  WANG Xiao-Xi  ZHU Liu-Yang  GAO Qiang  GAO Hui-Mei and ZHANG Ying
Institution:1. Key Laboratory of Industrial Fermentation Microbiology, Ministry of Education, College of Biotechnology, Tianjin University of Science & Technology, Tianjin 300457, China; 2. Tianjin SF-Bio Industrial Bio-Tec Co., Ltd., Tianjin 300462, China,1. Key Laboratory of Industrial Fermentation Microbiology, Ministry of Education, College of Biotechnology, Tianjin University of Science & Technology, Tianjin 300457, China,1. Key Laboratory of Industrial Fermentation Microbiology, Ministry of Education, College of Biotechnology, Tianjin University of Science & Technology, Tianjin 300457, China,1. Key Laboratory of Industrial Fermentation Microbiology, Ministry of Education, College of Biotechnology, Tianjin University of Science & Technology, Tianjin 300457, China,2. Tianjin SF-Bio Industrial Bio-Tec Co., Ltd., Tianjin 300462, China and 3. Key Laboratory of Food Nutrition and Safety, Ministry of Education, College of Food Engineering and Biotechnology, Tianjin University of Science & Technology, Tianjin 300457, China
Abstract:
Keywords:Ochratoxin A  Aspergillus niger  Polymerase chain reaction  Detection
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