| 硫色曲霉木聚糖酶基因xynA与xynB在大肠杆菌中的融合表达及酶学性质分析 |
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| 引用本文： | 李一航,乔家运,曹云鹤. 硫色曲霉木聚糖酶基因xynA与xynB在大肠杆菌中的融合表达及酶学性质分析[J]. 生物化学与生物物理进展, 2007, 34(10): 1086-1091 |
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| 作者姓名： | 李一航 乔家运 曹云鹤 |
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| 作者单位： | 中国农业大学，农业部饲料工业中心，动物营养学国家重点实验室，北京 100094;中国农业大学，农业部饲料工业中心，动物营养学国家重点实验室，北京 100094;中国农业大学，农业部饲料工业中心，动物营养学国家重点实验室，北京 100094 |
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| 基金项目： | 国家科技部动物营养与饲料加工创新群体科学基金资助项目(30121004)． |
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| 摘 要： | 根据硫色曲霉木聚糖酶基因xynA和xynB序列设计引物，PCR扩增获得574 bp、594 bp的目的基因片段．两段DNA分别用EcoRⅠ/BamHⅠ、BglⅡ/HindⅢ酶切后，连接到载体pET-28a(+)的多克隆位点，构建了xynA和xynB融合表达载体pET-xynAB，即在木聚糖酶A和B之间引入了7个氨基酸的寡肽序列(GlyGlyGlySerGlyGlyGly)．将pET-xynAB转化大肠杆菌BL21，经IPTG诱导，SDS-PAGE检测到了一条约50 ku的特异性表达条带．Ni-NTA柱纯化后的特异性蛋白经8 mol/L脲素变性，梯度透析使蛋白质复性．酶学性质分析表明，该重组木聚糖酶的最适催化温度为50℃，最适pH值为4.4．在pH 2.4～5.4范围内，酶的相对活性都在75%以上，重组酶在80℃保温30 min还有近50%的残余酶活．不同种类的金属离子对重组酶的活力影响不同．
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| 关 键 词： | 硫色曲霉，木聚糖酶，融合表达 |
| 收稿时间： | 2007-03-01 |
| 修稿时间： | 2007-03-01 |
In-fusion Expression of Xylanase Genes XynA and XynB From Aspergillus sulphureus in E. coli and Characterization of The Recombinant Enzyme |
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| LI Yi-Hang,QIAO Jia-Yun and CAO Yun-He. In-fusion Expression of Xylanase Genes XynA and XynB From Aspergillus sulphureus in E. coli and Characterization of The Recombinant Enzyme[J]. Progress In Biochemistry and Biophysics, 2007, 34(10): 1086-1091 |
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| Authors: | LI Yi-Hang QIAO Jia-Yun CAO Yun-He |
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| Affiliation: | Ministry of Agriculture Feed Industry Center, State Key Laboratory of Animal Nutrition, China Agricultural University, Beijing 100094, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Aspergillus sulphureus xylanase in-fusion expression |
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