| 青鳉p53基因克隆、结构分析及同源重组载体构建 |
| |
| 引用本文： | 陈松林,HONG Yun-Han,Manfred SCHARTL.青鳉p53基因克隆、结构分析及同源重组载体构建[J].动物学报,2002,48(4):519-526. |
| |
| 作者姓名： | 陈松林 HONG Yun-Han Manfred SCHARTL |
| |
| 作者单位： | 1. 中国水产科学研究院黄海水产研究所,青岛,266071
2. Physiological Chemistry I, University of Wuerzburg, 97074 Wuerzburg, Germany |
| |
| 基金项目： | 人事部留学回国人员科技活动择优基金，， |
| |
| 摘 要： | 应用“Long PCR”技术 ,用 6对 p5 3引物从青胚胎干细胞基因组DNA中扩增出 6个相互重叠的片段 ,其中最大的片段长达 4 5kb ,这 6个PCR片段覆盖了整个 p5 3基因。序列分析表明青p5 3基因长约 8 7kb ,由 11个外显子和 10个内含子组成。结构比较表明 ,青 p5 3基因在大小上与人和小鼠 p5 3基因存在较大差异。青p5 3基因的内含子 1仅为 0 85kb ,而人和小鼠p5 3基因的内含子 1则分别长达 10kb和 6kb ;青 p5 3基因的外显子 3(86bp)明显大于人和小鼠 p5 3基因的外显子 3(2 2bp) ;外显子 4 (170bp)比人 (2 80bp)和小鼠 (2 6 0bp)的外显子 4小 ;内含子 10 (3 5kb)则比人和小鼠内含子 10 (0 7kb和 0 9kb)大得多。用SVTK neo基因作正选择标记基因 ,用SVTK tk基因作负选择标记基因 ,用青 p5 3基因组片段作同源序列 ,构建了鱼类 p5 3基因同源重组载体。将此载体转染青胚胎干细胞 ,并经G4 18和Ganc药物选择后证明上述正、负选择标记基因在干细胞中能够有效表达 ,并提供对G4 18的抗性和对Ganc的敏感性。
|
| 关 键 词： | 青鳉 p53基因 结构 同源重组载体 胚胎干细胞 |
| 修稿时间： | 2001年9月19日 |
CLONING, STRUCTURAL ANALYSIS AND CONSTRUCTION OF HOMOLOGOUS RECOMBINATION VECTOR OF P53 GENE IN MEDAKA FISH (ORYZIAS LATIPES) |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Medaka ( Oryzias latipes ) p53 gene Structure Homologous recombination vector ES cell |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
|
