单细胞凝胶电泳联合原子力显微镜观测UVB诱导的细胞DNA损伤模式变化

目的：检测UVB诱导的真核细胞DNA损伤。方法：采用单细胞凝胶电泳与原子力显微镜。结果：不同照射剂量的UVB引起的真核细胞DNA损伤模式不同。在0～20J／m2照射剂量范围内DNA无损伤；在20--360J／m2照射剂量范围内DNA损伤程度加快；当照射剂量超过360J／m2时DNA损伤速度减慢，实验组之间无显著性差异，出现“平台”。原子力显微镜的观察结果表明随着UVB照射剂量的增加，DNA结构的变化经历了断裂、交联与断裂并存的损伤增强趋势。当照射能量达到280J／m2时细胞DNA大都形成断片，并相互交联在一起。这一结果表明彗星电泳检测到的UVB照射剂量达到一定剂量后，DNA损伤出现”平台”的原因可能是此时DNA发生了链内或链间交联。结论：不同照射剂量的UVB造成的细胞DNA损伤模式不同；原子力显微镜是一种比较直观的观测DNA损伤的方法。借助原子力显微镜我们可以深入了解单细胞凝胶电泳检测的原理，为DNA损伤检测提供更优良的检测手段。