体外诱导小鼠脂肪来源干细胞向内皮细胞分化的实验研究

目的：探索体外小鼠脂肪来源干细胞（Adipose—derivedstemcells，ASCs）诱导分化为内皮细胞（endothelialprogenitorcells，EPCs）的可行性。方法：利用I型胶原酶消化法和传代培养纯化法从小鼠脂肪组织中分离、培养及扩增ASCs，通过流式细胞仪检测ASCs特异性表面抗原CD29和CD44、CD105的表达；取第2代ASCs进行内皮诱导：即BD基质胶包被＋内皮细胞生长诱导培养基（M199＋10％血清＋10ng／mL血管内皮细胞生长因子VEGF＋10ng／ml碱性生长因子bFGF）。诱导两周左右，倒置显微镜观察诱导前后细胞的一般形态学特征；同时通过成血管实验观察成管腔能力；通过免疫荧光鉴定CD31表型分子的表达。结果：成功培养小鼠ASCs；CD29、CD44、CD90、呈阳性表达，而CD31、CD34、CD45呈阴性表达；诱导后的细胞形态呈三角形或多边形；HE染色观察可见明显的管腔样结构；免疫荧光法CD31表达阳性；MTT法成功记录EPCs增殖生长曲线。结论：成功的诱导小鼠脂肪来源干细胞分化为血管内皮细胞，为后续体内移植实验提供理论基础，同时也为临床受损组织或器官的重建再生提供实验基础。