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调节TGF-β1/Smad信号通路对内质网应激状态下肝癌HepG2细胞凋亡的影响
引用本文:黄亚纬,熊莉,窦德宇,吕梦娟,马玉红.调节TGF-β1/Smad信号通路对内质网应激状态下肝癌HepG2细胞凋亡的影响[J].中国应用生理学杂志,2021,37(3):266-271.
作者姓名:黄亚纬  熊莉  窦德宇  吕梦娟  马玉红
作者单位:1. 皖南医学院临床医学实验实训中心; 2. 皖南医学院中心实验室, 安徽 芜湖 241000
基金项目:*安徽省高校自然科学研究重点项目(KJ2018A0264);活性生物大分子研究安徽省重点实验室自主研究课题(LAB201810
摘    要:目的: 探讨TGF-β1/Smad信号通路对内质网应激(ERS)状态下肝癌HepG2细胞凋亡的影响机制。方法: 首先建立内质网应激模型:以3 μmol/L的衣霉素(TM)处理人肝癌HepG2细胞株24 h,诱导细胞发生ERS。实验分为6组,每组3个复孔,实验重复3次,6组分别为:Untreated组(未处理组)、TM组(3 μmol/L TM处理组)、TM+NC组(3 μmol/L TM+si-TGF-β1阴性对照组)、TM+si-TGF-β1组(3 μmol/L TM+si-TGF-β1组)、TM+pEX-3组(3 μmol/L TM+质粒对照组)及TM+TGF-β1 pEX-3组(3 μmol/L TM+TGF-β1过表达质粒组),利用脂质体的方法将TGF-β1小干扰RNA(si-TGF-β1)及TGF-β1过表达质粒(TGF-β1 pEX-3)转染入HepG2细胞,转染24 h后,利用RT-qPCR和Western blot检测各组HepG2细胞TGF-β1/Smad信号通路相关因子TGF-β1、p-Smad2表达的情况;CCK-8和流式细胞术分别检测各组HepG2细胞增殖抑制率和凋亡率变化情况。结果: 与Untreated组相比,TM组细胞的TGF-β1及p-Smad2的表达明显降低(P<0.05);与TM组相比,TM+si-TGF-β1组细胞的TGF-β1及p-Smad2的表达和细胞的增殖抑制率、凋亡率显著降低(P<0.01),而TM+TGF-β1 pEX-3组细胞的TGF-β1及p-Smad2的表达和细胞增殖抑制率、凋亡率显著升高(P<0.01)。结论: TGF-β1/Smad信号通路在肝癌HepG2细胞发生ERS后受到抑制,当该通路被激活后,ERS状态下肝癌HepG2细胞的凋亡率显著升高。

关 键 词:肝癌HepG2细胞  内质网应激  TGF-β1/Smad信号通路  凋亡  
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