人β2-微球蛋白基因克隆及其在大肠杆菌中的高效表达 |
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引用本文: | 何贤辉,徐丽慧,刘毅,曾耀英.人β2-微球蛋白基因克隆及其在大肠杆菌中的高效表达[J].生物工程学报,2004,20(1):99-103. |
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作者姓名: | 何贤辉 徐丽慧 刘毅 曾耀英 |
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作者单位: | 1. 组织移植与免疫教育部重点实验室,暨南大学,广州,510632 2. 组织移植与免疫教育部重点实验室,暨南大学,广州,510632;暨南大学生物工程研究所,广州,510632 3. 组织移植与免疫教育部重点实验室,暨南大学,广州,510632;郑州大学第一附属医院皮肤科,郑州,450052 |
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基金项目: | 国家自然科学基金重点项目(No.30230350)和科技部重点基础研究发展规划项目("973")资助(No.G2000057006). |
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摘 要: | β2-微球蛋白(β2m)是主要组织相容性复合体(MHC)Ⅰ类分子的轻链部分,为制备MHCⅠ类分子四聚体的必要成分。根据已报道的序列设计特异引物,利用RT-PCR方法从人白细胞中克隆了β2m基因,并构建了成熟β2m的原核表达载体,在大肠杆菌中得到高效表达。表达的β2m大部分在包涵体中,经洗涤、变性和复性,并以强阴离子交换柱层析纯化,获得SDS-PAGE纯的人重组β2m,Western印迹法分析表明该蛋白具有与抗人天然β2m抗体反应的特性。此工作为制备MHCⅠ类分子四聚体奠定基础。
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关 键 词: | β2-微球蛋白基因 克隆 大肠杆菌 表达 基因克隆 重组蛋白 包涵体 |
文章编号: | 1000-3061(2004)01-0099-05 |
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