| 敲低GATA1慢病毒表达载体的构建及敲低效果检测 |
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| 引用本文： | 张亚楠,刘婕,林娅红,周蕾,丁丽华,叶棋浓.敲低GATA1慢病毒表达载体的构建及敲低效果检测[J].生物技术通讯,2013,0(5):621-623. |
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| 作者姓名： | 张亚楠 刘婕 林娅红 周蕾 丁丽华 叶棋浓 |
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| 作者单位： | 张亚楠 (军事医学科学院 生物工程研究所,北京,100850)； 刘婕 (军事医学科学院 生物工程研究所,北京,100850)； 林娅红 (军事医学科学院 生物工程研究所,北京,100850)； 周蕾 (军事医学科学院 生物工程研究所,北京,100850)； 丁丽华 (军事医学科学院 生物工程研究所,北京,100850)； 叶棋浓 (军事医学科学院 生物工程研究所,北京,100850)； |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(81272231)；北京市科技新星计划(项目编号：2011112) |
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| 摘 要： | 目的：为了探讨与人血细胞相关的GATA1转录因子在实体肿瘤发生发展中的功能，构建GATA1的慢病毒干扰载体，并验证其敲低效果。方法：根据人GATA1的cDNA序列，设计含有小发卡结构的寡核苷酸序列，将其克隆到慢病毒表达载体上；将重组质粒转染人胚肾293T细胞，通过实时定量RT-PCR及Western印迹检测GATA1的表达水平。结果和结论：构建了具有明显干扰效果的GATA1基因的小干扰RNA（siRNA）慢病毒表达载体，能够有效抑制GATA1 mRNA和蛋白水平，为后续的GATA1生物学作用研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | GATAl 慢病毒载体 RNA干扰 |
Construction of a Lentiviral Vector for GATA1 Small-Interfering RNA and its Knockdown Effect Detection |
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| ZHANG Ya-Nan,LIU Jie,LIN Ya-Hong,ZHOU Lei,DING Li-Hua＊,YE Qi-Nong.Construction of a Lentiviral Vector for GATA1 Small-Interfering RNA and its Knockdown Effect Detection[J].Letters in Biotechnology,2013,0(5):621-623. |
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| Authors: | ZHANG Ya-Nan LIU Jie LIN Ya-Hong ZHOU Lei DING Li-Hua＊ YE Qi-Nong |
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| Institution: | ＊ Beijing Institute of Biotechnology, Beijing 100850, China |
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| Abstract: | Objective： To study the biological function of human blood cells-associated GATA1 in the development and progression of solid tumor, the lentiviral vector for GATA1 small-interfering RNA（siRNA） was constructed and its knockdown effect was determined. Methods： GATA1 siRNA was designed and constructed based on human GATA1 cDNA sequence using a lentiviral vector. The expression of GATA1 was examined by real-time RT-PCR and Western blot analysis. Results ＆ Conclusion： A lentivirus RNA interference vector targeting GATA1 gene was successfully constructed, which laid the foundation for further study of GATA1 function. |
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| Keywords: | GATA1 lentivirus vector RNA interference |
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