| 用差异显示PCR法筛选与血管外膜细胞表型转化相关的基因 |
| |
| 引用本文： | Sun AJ,Gao PJ,Liu JJ,Ji KD,Zhu DL. 用差异显示PCR法筛选与血管外膜细胞表型转化相关的基因[J]. 生理学报, 2001, 53(6): 435-439 |
| |
| 作者姓名： | Sun AJ Gao PJ Liu JJ Ji KD Zhu DL |
| |
| 作者单位： | 上海第二医科大学附属瑞金医院上海市高血压研究所,上海,200025 |
| |
| 基金项目： | This work was supported by the National Key Programm on Basal Research (No.G20000569004) |
| |
| 摘 要： | 为筛选血管外膜成纤维细胞（adventitial fibroblast,AF）与肌成纤维细胞（myofibroblast,MF）间表型转化有关的基因,实验建立了大鼠胸主动脉AF和MF两种细胞模型,用差异显示聚合酶链反应（DD－PCR）技术获得表达差异片段,对差异片段进行克隆和测序分析,并用定量PCR和Northern blot对差别显示结果进行验证。用反义核酸转染技术观察骨桥蛋白（osteopontin,OPN）对AF迁移的影响。结果表明,两种表型细胞存在明显的基因表达差异,其中一个在MF下调的差异片段与GenBank中NADH脱氢酶亚单位5（NADH dehydrogenase subunit 5,Nd5）基因高度同源。另一个在MF上调的差异片段与OPN基因同源。上述差异表达结果被定量PCR及Northern blot证实。此外还有4个表达序列标志（expressed sequence-tag,EST）在GenBank中未查到同源序列。反义OPN寡脱氧核甘酸可抑制AF的迁移活动。结果提示,AF转化为MF可能与ND5基因下调、OPN上调及其它未知基因的表达改变有关。应用反义技术适度抑制OPN表达在防治血管重塑中具有重要作用。
|
| 关 键 词： | 血管外膜成纤维细胞 肌成纤维细胞 差异显示聚合酶链反应 反义技术 血管重塑 |
| 修稿时间： | 2001-02-26 |
Identification of genes related to cell phenotypic transition by differential display analysis |
| |
| Sun A J,Gao P J,Liu J J,Ji K D,Zhu D L. Identification of genes related to cell phenotypic transition by differential display analysis[J]. Acta Physiologica Sinica, 2001, 53(6): 435-439 |
| |
| Authors: | Sun A J Gao P J Liu J J Ji K D Zhu D L |
| |
| Affiliation: | Shanghai Institute of Hypertension, Ruijin Hospital,Shanghai Second Medical University, Shanghai, China. |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | adventitia fibroblasts myofibroblasts differential display PCR antisense |
| 本文献已被 CNKI 维普 万方数据 PubMed 等数据库收录！ |
|
