摘 要: | 目的检测分析Noggin基因沉默对毛囊发育中BMP和Wnt信号通路的影响。方法采用实时荧光定量PCR和western blot技术对Noggin基因沉默的MC3T3-E1稳转细胞系中BMP-2、BMP-4、BMPR-IA、BMP-6、BMP-7、LEF-1、β-catenin的表达情况进行检测分析。结果实时荧光定量PCR结果显示,BMP信号通路中的五个基因的表达都受到Noggin基因沉默的显著的影响,其中BMP-2(P0.001)、BMP-4(P0.01)、BMP-6(P0.001)、BMP-7(P0.001)表达量均升高;BMPR-IA(P0.01)表达量降低。同时Wnt信号通路中的两个基因LEF-1(P0.001)、β-catenin(P0.001)的表达也都显著降低。Western blot结果显示,两条信号通路中这几种蛋白的表达也都受到影响,其中显著升高的有BMP-2(P0.05)、BMP-4(P0.05)、BMP-6(P0.05)和BMP-7(P0.05);显著降低的是β-catenin(P0.05)、BMPR-IA(P0.01)和LEF-1(P0.001)。结论在体外Noggin基因对BMP信号通路可能存在反馈性抑制机制,而对Wnt信号通路存在反馈性激活机制,为下一步探究在体内Noggin基因对BMP和Wnt信号通路表达的作用提供一定的依据。
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