EcoRI限制性内切酶底物专一性的研究——具有核糖修饰的EcoRI底物类似物的合成 |
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作者姓名: | 汤锦炎 杨新颖 周晓雄 高翔 孙宇泰 陈常庆 |
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作者单位: | 中国科学院上海生物化学研究所(汤锦炎,杨新颖,周晓雄,高翔,孙宇泰),中国科学院上海生物化学研究所(陈常庆) |
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摘 要: | 本文报道用化学和酶促相结合的方法合成了d-GGArATTCC和d-GGArATTC。酶促反应结果说明,当受体3′末端为核糖核苷时大大促进RNA连接酶的作用。产物的结构均经蛇毒磷酸二酯酶部分酶解后的电泳-同系层析双向图谱鉴定得到证明。这两种类似物都能被EcoRI限制性内切酶识别并在专一位置上水解,结果说明EcoRI的识别顺序中第四位上d-A变为r-A并不显著影响酶的识别,而且证明了EcoRI的最小底物是含有识别顺序的七聚脱氧核苷酸。
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