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番茄离体花柄脱落区多聚半乳糖醛酸酶提取纯化体系的优化
引用本文:徐杨,齐明芳,李天来,许涛.番茄离体花柄脱落区多聚半乳糖醛酸酶提取纯化体系的优化[J].西北植物学报,2008,28(3):617-623.
作者姓名:徐杨  齐明芳  李天来  许涛
作者单位:辽宁省设施园艺重点实验室,沈阳农业大学,园艺学院,沈阳,110161
基金项目:国家自然科学基金(30571265);教育部博士点基金(20040157004);沈阳农业大学青年教师科研基金(2005027)
摘    要:多聚半乳糖醛酸酶是植物器官脱落过程中的重要水解酶,实验以20μL.L-1乙烯处理的离体番茄花柄为试材,建立了与脱落相关的多聚半乳糖醛酸酶提取与纯化体系:以50 mmol.L-1乙酸缓冲液(pH=5.5)为提取液,加入0.1 mol.L-1NaCl、1 mmol.L-1DTT提取效果较好;将酶的粗提液低温浓缩后,经Sephadex G-75凝胶层析分离纯化,最佳流速为0.2 mL.min-1,适宜上样量为3.5 mL;再将凝胶层析分离的活性部分低温浓缩后,经CM Sepharose CL-6B离子交换层析再次纯化,流速为0.3 mL.min-1、洗脱液pH值5.5纯化效果最好。经上述提取纯化过程,得到了分子质量为30.2 kD的多聚半乳糖醛酸酶蛋白。该提取纯化体系为探讨与脱落相关酶的性质及其活性调控提供了参考。

关 键 词:番茄  脱落  多聚半乳糖醛酸酶
文章编号:1000-4025(2008)03-0617-07
修稿时间:2007年9月18日

Purification System of A Polygalacturonase from Tomato Pedicel Abscission Zone
XU Yang,QI Ming-fang,LI Tian-lai,XU Tao.Purification System of A Polygalacturonase from Tomato Pedicel Abscission Zone[J].Acta Botanica Boreali-Occidentalia Sinica,2008,28(3):617-623.
Authors:XU Yang  QI Ming-fang  LI Tian-lai  XU Tao
Abstract:
Keywords:tomato  abscission  polygalaturonase
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