| 人α-乳清蛋白基因的克隆及其在转基因小鼠中高效表达 |
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| 作者姓名： | 于舒洋 曹更生 樊宝良 李宁 段颖莉 戴蕴平 王莉莉 |
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| 作者单位： | 中国农业大学农业生物技术国家重点实验室,北京,100094 |
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| 基金项目： | 国家高技术“863”计划资助项目(2002AA206111). |
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| 摘 要： | 从粘粒文库中筛选出人α-乳清蛋白基因，构建9.5 kb的转基因表达载体.利用显微注射的方法获得68只F0代小鼠，经PCR检测和DNA印迹分析证实有8只小鼠（4♂，4♀）为整合人α-乳清蛋白基因的转基因阳性小鼠，整合率为11.7%，整合拷贝数在1至8之间.利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测和蛋白质印迹分析,4只雌性F0代转基因阳性小鼠全部表达了人α-乳清蛋白.放射免疫测定法测定,含量分别为0.62 g/L、0.48 g/L、0.56 g/L、3.21 g/L；同时测定F0代50号转基因公鼠的后代阳性母鼠（50-2号）乳样中人α-乳清蛋白含量也达到1.03 g/L，证明由原代转基因公鼠遗传给后代的人α-乳清蛋白基因亦获得了稳定的表达.所构建的人α-乳清蛋白转基因载体具有结构较小，表达量高，可以稳定遗传等优点.为利用人α-乳清蛋白基因改善牛乳成分和品质奠定了基础.
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| 关 键 词： | 人α-乳清蛋白，转基因小鼠，表达 |
| 收稿时间： | 2003-08-05 |
| 修稿时间： | 2003-09-28 |
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