大鼠肝细胞核体外转录系统的研究

本文介绍以快速法提取细胞核,加入四种核苷三磷酸、~(3)H-UTP 和适当金属离子,进行细胞核转录作用的研究。观察了底物浓度、温度、酸硷度等与转录活性的关系;研究了Mg~(2 )、Mn~(2 )、Ca~(2 )、Co~(2 )、K~ 、NH~ _4、Na~ 等离子和放线菌素D、肝素对转录活性的影响。结果显示一定浓度Mg~(2 )、Mn~(2 )、K~ 、NH~ _4、Na~ 和肝素能提高转录活性;而Ca~(2 )、Co~(2 )和放线菌素D 有抑制作用。选择了适当的离子浓度以能显示较高的RNA 聚合酶B 的活性。此转录系统的活性与一定范围内的细胞核浓度呈直线关系。