| 人小肠三叶因子在糙皮侧耳中的整合、表达及检测 |
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| 引用本文： | 徐晓晶,张竞,李曦,俞梅敏,茹炳根.人小肠三叶因子在糙皮侧耳中的整合、表达及检测[J].微生物学报,2004,44(5):609-612. |
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| 作者姓名： | 徐晓晶 张竞 李曦 俞梅敏 茹炳根 |
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| 作者单位： | 北京大学生命科学学院蛋白质工程和植物基因工程国家重点实验室,北京,100871 |
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| 摘 要： | 用原生质体法将含双 35S_AMV启动子及人小肠三叶因子 (hITF)cDNA的表达载体导入糙皮侧耳 (Pleurotusostreatus)中 ,原生质体转化子在含有除草剂的培养基上初步筛选 ,获得抗性菌株。通过PCR分析证明hITFcDNA已整合到侧耳基因组中。以hITF为抗原免疫家兔制备了抗血清 ,纯化后的IgG以直接型酶联免疫吸附检测 (ELISA)方法测定效价 ,并建立起hITF的竞争型酶联免疫吸附检测 (ELISA)方法 ,给出了标准工作曲线 ,以应用于大规模表达菌株的筛选确立。检测表明 ,hITF在侧耳新鲜菌丝体中分 3个表达量段 :10 0 0～ 12 5 0ng g、14 80～ 170 0ng g、最高达2 0 0 0～ 2 2 5 0ng g ,约占总可溶性蛋白的 0 7%～ 1 5 %。Western印迹进一步分析证明hITF在侧耳中的表达。
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| 关 键 词： | 人小肠三叶因子(hITF) 糙皮侧耳 竞争型ELISA |
| 文章编号： | 0001-6209(2004)05-0609-04 |
| 修稿时间： | 2004年1月16日 |
Expression of Human Intestinal Trefoil Factor (hITF) in Transgenic Pleurotus ostreatus and Its ELISA Assay |
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| XU Xiao-Jing,ZHANG Jing,LI Xi,YU Mei-Min,RU Bing-Gen..Expression of Human Intestinal Trefoil Factor (hITF) in Transgenic Pleurotus ostreatus and Its ELISA Assay[J].Acta Microbiologica Sinica,2004,44(5):609-612. |
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| Authors: | XU Xiao-Jing ZHANG Jing LI Xi YU Mei-Min RU Bing-Gen |
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| Institution: | XU Xiao-Jing ZHANG Jing LI Xi YU Mei-Min RU Bing-Gen~*. |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Human intestinal trefoil factor (hITF) Pleurotus ostreatus Competitive ELISA |
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