用遗传工程技术构建含E．Coil K88ac和LT(A-B+)两种抗原基因的菌株

用我室克隆的含大肠杆菌K88ac抗原基因的pMM031质粒和含肠毒素LT(A^-B⁺)抗原基因的质粒pPMc4，使用限制性内切酶BamHI酶解，取得了K88ac抗原基因的片段，再经和BamH I消化的质粒pPmc4连接重组，构建了同时具有这两种抗原基因的质粒pMM085羟琼脂糖凝胶电泳分析，pMM085质粒的分子量约为14．6Md，在宿主菌E．CoilC600，经过ELISA和反向间接血凝等几种试验测定K88ac抗原，结果都说明其抗原产量与亲本菌株基本相同。重组菌的抗甘露糖豚鼠红细胞凝集反应也是阳性。对肠毒素抗原用被动溶血试验测定，结果说明其LT-B的产量和亲本菌的产量也基本相同。重组的工程菌株经兔肠结扎试验表明没有毒性反应，因此重组菌株可以作为预防仔猪腹泻的活菌疫苗候选株。