| 巴西橡胶树HbICE1基因酵母双杂交诱饵载体的构建及互作蛋白的筛选 |
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| 引用本文： | 欧阳沫,唐潇,黄惜,袁红梅. 巴西橡胶树HbICE1基因酵母双杂交诱饵载体的构建及互作蛋白的筛选[J]. 植物科学学报, 2016, 34(2): 255-262. DOI: 10.11913/PSJ.2095-0837.2016.20255 |
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| 作者姓名： | 欧阳沫 唐潇 黄惜 袁红梅 |
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| 作者单位： | 海南大学农学院, 海口 570228 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(31560197);海南省自然科学基金项目(20153092);海南省教育厅项目(Hnky2015-4);海南大学科研启动基金资助(kyqd1437) |
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| 摘 要： | 寒害是我国植胶区的主要自然灾害之一,不仅影响橡胶产量还威胁到橡胶树的生存。拟南芥中,ICE1是低温胁迫信号通路中的重要转录激活因子,但橡胶树冷胁迫信号途径中包括Hb ICE1在内的大部分关键基因尚未被克隆与鉴定,与Hb ICE1蛋白发生互作的蛋白也不清楚,成为严重阻碍橡胶树抗寒分子机理研究的瓶颈。为了筛选和鉴定与巴西橡胶树Hb ICE1蛋白发生互作的蛋白,阐明橡胶树抵御寒害胁迫的分子机理,本文首先通过PCR扩增出Hb ICE1基因的编码序列(约1400 bp),然后将目标序列插入p GBKT-7载体,构建酵母双杂交诱饵载体;将该载体转入酵母Y2H菌株感受态细胞中,并在缺陷型培养基上检测其自激活活性,发现Hb ICE1基因的自转录激活在含有30 mmol/L和更高浓度3-AT(3-氨基-1,2,4-三氮唑)的培养基上能得到有效抑制;进一步通过与橡胶树c DNA文库进行酵母双杂交,筛选出一些可能与Hb ICE1发生互作的蛋白,包括DNA结合蛋白、核糖体蛋白和功能未知蛋白。本研究结果为橡胶树抗寒机理研究提供了重要理论依据。
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| 关 键 词： | 巴西橡胶树 HbICE1 酵母双杂 蛋白互作 冷耐受 |
| 收稿时间： | 2015-12-24 |
Construction of Yeast Two-hybrid Bait Vector and the Screening of Proteins Interacting with HbICE1 in Hevea brasiliensis |
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| OUYANG Mo,TANG Xiao,HUANG Xi,YUAN Hong-Mei. Construction of Yeast Two-hybrid Bait Vector and the Screening of Proteins Interacting with HbICE1 in Hevea brasiliensis[J]. Plant Science Journal, 2016, 34(2): 255-262. DOI: 10.11913/PSJ.2095-0837.2016.20255 |
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| Authors: | OUYANG Mo TANG Xiao HUANG Xi YUAN Hong-Mei |
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| Affiliation: | College of Agriculture, Hainan University, Haikou 570228, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Hevea brasiliensis HbICE1 Yeast two-hybrid Proteins interaction Chilling tole-rance |
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