| 细胞内RT－PCR扩增免疫球蛋白重链可变区基因 |
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| 引用本文： | 李昌龙,赵满仓,王抒,蒋雷,李健斋. 细胞内RT－PCR扩增免疫球蛋白重链可变区基因[J]. 生物化学与生物物理进展, 1995, 22(4): 380-382 |
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| 作者姓名： | 李昌龙 赵满仓 王抒 蒋雷 李健斋 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目. |
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| 摘 要： | 通常，逆转录ＰＣＲ（ＲＴ－ＰＣＲ）需要高质量的ｍＲＮＡ，操作过程复杂，效率低且易受到ＲＮａｓｅ的破坏，为了简化操作，提高效率，用１０％甲醛盐溶液固定杂交瘤细胞，以ＮＰ－４０渗透化处理细胞后做ＲＴ－ＰＣＲ，获得了大约３５０ｂｐ的特异性免疫球蛋白重链可变区基因片段，与用同一对引物得到的常规ＲＴ－ＰＣＲ扩增产物一致。这项技术可用于获得特定结构基因片段，连结并扩增嵌合蛋白基因及构建多克隆免疫球蛋白文库等。
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| 关 键 词： | 细胞 RT－PCR 重链可变区基因 免疫球蛋白 |
| 收稿时间： | 1994-08-09 |
In-Cell Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction(In-cell-RT-PCR):Amplifying the Reverse Transcripted lmmunoglobulin Heavy Chain Gene Fragment within Hybridoma Cells |
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| Li Changlong,Zhao Mancang,Wang Shu,Jiang Lei and Li Jianzhai. In-Cell Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction(In-cell-RT-PCR):Amplifying the Reverse Transcripted lmmunoglobulin Heavy Chain Gene Fragment within Hybridoma Cells[J]. Progress In Biochemistry and Biophysics, 1995, 22(4): 380-382 |
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| Authors: | Li Changlong Zhao Mancang Wang Shu Jiang Lei Li Jianzhai |
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