人生长激素基因在昆虫细胞中的表达(英文) |
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引用本文: | 耿朝晖,俞新大,周卫东,张宝珠,李建民,余慕贞,王英.人生长激素基因在昆虫细胞中的表达(英文)[J].基因组蛋白质组与生物信息学报,1998(1). |
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作者姓名: | 耿朝晖 俞新大 周卫东 张宝珠 李建民 余慕贞 王英 |
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作者单位: | 南开大学生化系,中科院动物所 |
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摘 要: | 近年发展起来的昆虫细胞-杆状病毒基因工程系统具有良好的优越性:(1)表达产量高,(2)产物的免疫原性、功能性类似于天然产物,(3)适用于悬浮及无血清培养。本实验中,将外源基因hGH克隆至质粒pVL1393,形成转移载体pVL1393/hGH(Fig.1&2)。与昆虫核多角体病毒AcNPV基因组DNA共转染秋粘虫细胞Sf9(Fig.3),pVL1393/hGH与AcNPV基因组DNA发生同源重组,取代多角体蛋白基因。经空斑分析纯化得到不含多角体,单一表达的重组病毒rAcVhGH(Fig.4),感染滴度达到2.03x108PUF/mL。经反复实验,105细胞/mL感染6~7天后收获培养上清液,可得到表达量为40μg/mL的hGH蛋白(Fig.5,6&7)。
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