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海栖热袍菌耐高温β-半乳糖苷酶基因的克隆和表达
作者姓名:张 敏  江正强  唐 荦  丛倩千  李里特
作者单位:中国农业大学食品科学与营养工程学院,北京,100083
基金项目:教育部跨世纪优秀人才培养计划
摘    要:本文主要研究了在大肠杆菌中克隆和表达海栖热袍菌(Thermotoga maritima)MSB8的一个β-半乳糖苷酶基因 (TM_0310).以海栖热袍菌基因组 DNA(GenBank登录号 AE000512)为模板,设计特异性引物带有 NcoI-HindⅢ酶切位点,克隆得到的该基因全序列为2019 bp,编码672个氨基酸,分子量为78.972 kD.该基因编码的蛋白质属于42族,根据氨基酸同源性分析,该β-半乳糖苷酶与 Thermotoga petrophila RKU-1 来源的假想的β-半乳糖苷酶(GenBank 登录号 ABQ46628.1)以及Thermotoga sp.RQ2来源的β-半乳糖苷酶(GenBank 登录号 EDQ29256.1)同源性最高,均为95%.重组转化子经诱导酶比活可达2.08 U/mg 蛋白.粗酶液经过80℃热处理10 min,酶活残留70%以上,表明该酶有很好的耐热性,在高温工业环境中有良好应用前景.

关 键 词:海栖热袍菌  β-半乳糖苷酶  克隆  表达  高温  海栖热袍菌  耐高温β  半乳糖苷酶  基因的克隆和表达  Expression  Cloning  Gene  前景  应用  工业环境  耐热性  残留  酶活  热处理  粗酶液  蛋白质  诱导酶  转化子  重组  同源性分析
修稿时间:2007-09-12
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