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| 蟑螂浓核病毒(pfDNV)非结构基因启动子的活性研究 | |
| 引用本文： | 杨波,董小敏,蔡大威,刘志刚,胡征,汪浩勇,张珈敏,胡远扬.蟑螂浓核病毒(pfDNV)非结构基因启动子的活性研究[J].昆虫学报,2008,51(5):486-491. |
| 作者姓名： | 杨波 董小敏 蔡大威 刘志刚 胡征 汪浩勇 张珈敏 胡远扬 |
| 作者单位： | 1. 湖北工业大学生物技术系,武汉,430068;武汉大学病毒学国家重点实验室,武汉,430072 2. 武汉大学病毒学国家重点实验室,武汉,430072 3. 湖北工业大学生物技术系,武汉,430068 |
| 基金项目： | 湖北工业大学博士科研启动基金 |
| 摘 要： | 为了研究蟑螂 Periplaneta fuliginosa 浓核病毒(pfDNV)非结构基因转录调控的机制，用 PCR 的方法从蟑螂浓核病毒基因组 DNA 中扩增了非结构蛋白基因 ns3 翻译起始密码子上游 325 bp 的启动子序列；并进一步以其作为模板，利用聚合酶链式反应技术，得到 6 个不同长度的启动子片段和两个定点突变体片段，构建由其驱动的萤火虫荧光素酶基因报告质粒，在 脂质体介导下转染多种昆虫细胞，体外分析了该启动子的活性。结果表明：该 325 bp DNA 片段在 Sf9，S2，Tn368 及 Ld652 细胞中均具有较高的启动子活性；其转录起始基序 CAGT 对维持该启动子的基本转录活性而言是必需的，而 TATA 盒对此则是非必需的，但它的存在可显著提高启动子的转录活性。同时，我们还发现，病毒非结构蛋白 NS1 对该启动子具有反式激活作用，并且这种激活作用的大小取决于 NS1 蛋白在细胞中的浓度。 |
| 关 键 词： | 蟑螂浓核病毒 启动子 反式激活 昆虫细胞 表达载体 |
| 文章编号： | 0454-6296(2008)05-0486-06 |
| 修稿时间： | 2007年11月14 |
Characterization of the nonstructural gene promoter of Periplaneta fuliginosa densovirus |
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| YANG Bo,DONG Xiao-Min,CAI Da-Wei,LIU Zhi-Gang,HU Zheng,WANG Hao-Yong,ZHANG Jia-Min,HU Yuan-Yang.Characterization of the nonstructural gene promoter of Periplaneta fuliginosa densovirus[J].Acta Entomologica Sinica,2008,51(5):486-491. | |
| Authors: | YANG Bo DONG Xiao-Min CAI Da-Wei LIU Zhi-Gang HU Zheng WANG Hao-Yong ZHANG Jia-Min HU Yuan-Yang |
| Abstract: | |
| Keywords: | Periplaneta fuliginosa densovirus(PfDNV) promoter transactivation insect cells expression vector |
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