印度疟疾媒介库态按蚊卵黄蛋白原基因的克隆与生物信息学分析（英文）

卵黄蛋白原（vitellogenin, Vg)是主要的卵黄蛋白前体， 在雌虫血餐之后在脂肪体内大量合成。卵黄蛋白原的调节元件已经被用于驱动蚊子（与寄生虫发生最大相互作用的场所）中抗寄生基因的组织特异性表达。不过， 迄今为止， 对在印度引起60%~70%疟疾发生的库态按蚊Anopheles culicifacies中的内源启动子尚未进行过分析。本研究通过PCR扩增了包括5′端上游调节区在内的库态按蚊A. culicifacies卵黄蛋白原基因， 并命名为AncuVg (GenBank登录号为JN113091)。它含有一个大约6.2 kb的开放阅读框， 编码2 052个氨基酸， 具有一个16个氨基酸残基的推断的信号肽。也含有一个N_Vitellogenin区和一个VWF型D区， 这两个区在其他昆虫卵黄蛋白原中也保守。估计多肽分子量为238.0 kDa， 含有4个共有的(RXXR/S)切割位点， C端附近有一个GL/ICG基序， 其后是9个半胱氨酸残基和1个位于GL/ICCG基序上游第18个氨基酸残基处的DGXR 基序。在推断的氨基酸序列上发现3个聚丝氨酸区， 其中2个位于氨基端， 1个位于羧基端。根据同义密码子相对使用概率值， 通过有效密码子数， 测定了蚊子卵黄蛋白原基因密码子的偏倚性程度。也预测了库态按蚊A. culicifacies Vg的三维结构。分析了AncuVg基因， 以理解Vg基因的转录调节。对Vg基因5′端上游区进行的系统发育分析表明， 它们聚类于蚊子的3大分枝。也用各种生物信息学工具分析分析了Vg的同源性和特征。

Cloning and bioinformatical analysis of vitellogenin gene of the Indian malaria vector Anopheles culicifacies(Diptera: Culicidae)