| 丙型肝炎病毒F蛋白磷酸化位点突变与细胞内分布 |
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| 引用本文： | 邵圣文,于建国,武文斌,赵平,丁惠,戚中田.丙型肝炎病毒F蛋白磷酸化位点突变与细胞内分布[J].微生物与感染,2007,2(2):78-82. |
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| 作者姓名： | 邵圣文 于建国 武文斌 赵平 丁惠 戚中田 |
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| 作者单位： | 1. 第二军医大学微生物学教研室,军队医学微生物学重点实验室,上海,200433
2. 解放军第八十八医院济南军区肝病研究所 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划)
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军队医药卫生专项项目 |
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| 摘 要： | 目的 探讨丙型肝炎病毒(HCV)F蛋白磷酸化位点突变对其在细胞内分布位置及功能的影响。方法 应用NetPhos2.0Server软件预测F蛋白的磷酸化位点,据此设计重叠引物,利用引物之间相互延伸获得突变型HCVf基因,该基因第13、14、114、121和124位密码子由野生型f基因的TCT突变为GAT,对应氨基酸由丝氨酸(S)突变为天冬氨酸(D)。将突变型f基因及野生型f基因定向克隆至pEGFP-N1,得到pEGFP-mf和pEGFP-f重组子。采用脂质体法将重组子转染HepG2细胞,再用激光共聚焦显微镜观察突变型F蛋白以及野生型F蛋白在细胞内的分布情况,拍照并进行半定量分析。结果 在HepG2细胞中,突变型F蛋白主要分布在细胞核内(90%),细胞质内有少量分布(10%),平均荧光强度分别为63.70±3.20和7.06±0.34,两者差异有统计学意义(P<0.001,t=99.2);野生型F蛋白主要分布在细胞质内(94.9%),细胞核内有少量分布(5.1%),平均荧光强度分别为83.34±4.07和4.48±0.22,两者差异有统计学意义(P<0.001,t=106.5)。结论 onclick="SelectDisplayDiv('ChDivSummaryMoreSummary','ChDivSummaryMore');DisplaySpanDiv('ChDivSummaryHuanYuan')"> HCVF蛋白在细胞内存在磷酸化和非磷酸化2种形式,其功能也不同。细胞质内以磷酸化F蛋白为主,非磷酸化F蛋白主要位于细胞核内。磷酸化F蛋白可能参与HCV复制调节,非磷酸化F蛋白可能影响细胞核内基因转录。
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| 关 键 词： | F蛋白 磷酸化 |
| 修稿时间： | 2007-03-30 |
Intercellular distribution of hepatitis C virus F protein is associated with its mutation in phosphorylation sites |
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| SHAO Sheng-wen,YU Jian-guo,WU Wen-bin,ZHAO Ping,DING Hui,QI Zhong-tian.Intercellular distribution of hepatitis C virus F protein is associated with its mutation in phosphorylation sites[J].Journal of Microbes and Infection,2007,2(2):78-82. |
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| Authors: | SHAO Sheng-wen YU Jian-guo WU Wen-bin ZHAO Ping DING Hui QI Zhong-tian |
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| Institution: | Department of Microbiology, PIA key Laboratory for Medical Microbiology, Second Military Medical University, Shanghai 200433, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Hepatitis C virus F protein Phosphorylafion |
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