重组猪a干扰素基因定点突变及在大肠杆菌中的表达 |
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作者姓名: | 陈涛 于瑞嵩 刘惠莉 李震 曹祥荣 |
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作者单位: | 1. 南京师范大学生命科学学院,南京,210097 2. 上海市农业科学院畜牧兽医研究所,上海,201106;上海市农业遗传育种重点实验室,上海,201106 |
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基金项目: | 上海市农科院重点学科青年科技骨干培养基金. |
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摘 要: | 用巨引物PCR法介导的定点突变把猪α干扰素(PoIFN-α)第86位Cys(TGC)突变为Tyr(TAC),同时将其成熟蛋白N端第一个密码子TGT同义突变大肠杆菌偏爱的密码子TGC,构建了大肠杆菌融合基因表达载体pGEX-IFN,表达产物占菌体总蛋白的20%.将以包涵体形式表达的目的蛋白经变、复性处理,并以FPLC进一步纯化,得到了具有较高生物活性的产物(5200IU/mg).
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关 键 词: | 猪α干扰素 巨引物PCR 定点突变 包涵体 |
文章编号: | 1000-3061(2002)03-0339-04 |
修稿时间: | 2001-12-17 |
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