| 抗SARS-CoV-2 S蛋白IgM单克隆抗体的表达及鉴定 |
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| 作者姓名： | 张瑞雪 殷强玲 黄涛 钱振 芜为 王世文 梁米芳 孙丽娜 王晓芳 |
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| 作者单位： | 1. 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所;2. 湖北省疾病预防控制中心;3. 安徽医科大学基础医学院微生物学教研室 |
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| 摘 要： | 为了寻求SARS-CoV-2 IgM抗体阳性血清质控品的替代品，本研究成功表达纯化出抗SARS-CoV-2 S蛋白IgM单克隆抗体。研究确定了IgM单克隆抗体最佳表达载体为含增强子sp163和信号肽2的组合以及第5d为目的蛋白收获的最佳时间。此外在研究J链的作用时发现转染细胞时不添加J链（nCoV-163-IgM3）的表达量明显高于添加J链（nCoV-163-IgM3 J）时的表达量，J链对蛋白稳定性也无明显影响，且nCoV-163-IgM3和nCoV-163-IgM3 J抗原结合活性之间的差别无统计学意义（P>0.05）,nCoV-163-IgM3和nCoV-163-IgM3 J对本研究所检测的WTS1、Alpha-S1、Beta-S1、Delta-S1、Omicron-S1、BA.2-S1、BF.7-RBD、XBB.1-S1、BQ1.1-S1等九种抗原均有结合活性，只有一株（BA.2.75-RBD）逃逸。纯化后的目的蛋白经还原剂（β-ME）还原后显示重链分子量大小为70kD左右，轻链分子量大小为25kD左右。目的蛋白均可与新型冠状病毒抗体检测试剂盒（胶体金，INNOVITA）...
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| 关 键 词： | SARS-CoV-2 IgM单克隆抗体 J链 重组蛋白 |
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