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粪肠球菌精氨酸脱亚胺酶酶学性质研究
引用本文:李成付,李 凯,李加友,焦庆才,刘 茜,易立涛. 粪肠球菌精氨酸脱亚胺酶酶学性质研究[J]. 微生物学报, 2008, 35(6): 0846-0850
作者姓名:李成付  李 凯  李加友  焦庆才  刘 茜  易立涛
作者单位:南京大学生命科学学院 医药生物技术国家重点实验室 南京 210093;南京大学生命科学学院 医药生物技术国家重点实验室 南京 210093;南京大学生命科学学院 医药生物技术国家重点实验室 南京 210093;南京大学生命科学学院 医药生物技术国家重点实验室 南京 210093;南京大学生命科学学院 医药生物技术国家重点实验室 南京 210093;南京大学生命科学学院 医药生物技术国家重点实验室 南京 210093
基金项目:国家技术创新基金(No.02CJ-13-01-16)
摘    要:经硫酸铵分级沉淀、Q-Sepharose Fast Flow阴离子交换层析、SephadexG-75凝胶柱层析从NJ402自溶细胞超声破碎液中提纯得到精氨酸脱亚胺酶(ADI), 纯化倍数为34.5, 活力回收率为31.4%, 经SDS-PAGE以及Native-PAGE测定结果表明, ADI亚基分子量约为46 kD, 该酶非变性情况下的分子量约为190 kD左右, 该酶为同四聚体结构。酶学性质研究结果表明:ADI催化最适温度和最适pH分别为50℃和6.5, 在45℃以下和pH 5~8之间有很好的稳定性。ADI是L-型脱亚胺酶, 具有严格的光学选择性, 适当浓度的Mn2+、Mg2+、Co2+对ADI催化活力的促进作用较大, 高浓度的Zn2+和Co2+对酶有一定程度的抑制作用, L-瓜氨酸对酶无抑制作用而L-鸟氨酸却表现出较强的抑制作用。ADI在最佳催化条件下作用于L-精氨酸的米氏常数为3.2686 mmol/L, 最大反应速度为2.44 μmol/min。

关 键 词:粪肠球菌NJ402   精氨酸脱亚胺酶   分离纯化   酶学性质

The Research of Enzymology Characterization about Arginine Deiminase from Enterococcus faecalis
LI Cheng-Fu,LI Kai,LI Jia-You,JIAO Qing-Cai,LIU Qian and YI Li-Tao. The Research of Enzymology Characterization about Arginine Deiminase from Enterococcus faecalis[J]. Acta microbiologica Sinica, 2008, 35(6): 0846-0850
Authors:LI Cheng-Fu  LI Kai  LI Jia-You  JIAO Qing-Cai  LIU Qian  YI Li-Tao
Affiliation:The State Key Laboratory of Pharmaceutical Biotechnology, School of Life Science, Nanjing University, Nanjing 210093;The State Key Laboratory of Pharmaceutical Biotechnology, School of Life Science, Nanjing University, Nanjing 210093;The State Key Laboratory of Pharmaceutical Biotechnology, School of Life Science, Nanjing University, Nanjing 210093;The State Key Laboratory of Pharmaceutical Biotechnology, School of Life Science, Nanjing University, Nanjing 210093;The State Key Laboratory of Pharmaceutical Biotechnology, School of Life Science, Nanjing University, Nanjing 210093;The State Key Laboratory of Pharmaceutical Biotechnology, School of Life Science, Nanjing University, Nanjing 210093
Abstract:
Keywords:Enterococcus faecalis NJ402   Arginine deiminase   Purification   Characterization
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