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RNA干扰沉默低氧诱导因子-1α对低氧下大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖的影响
作者姓名:Zhang W  Cao Y  Zhang Y  Ma QS  Ma L  Ge RL
作者单位:青海大学高原医学研究中心,西宁,810001
摘    要:本研究应用基因克隆技术,将合成的发卡样特异性低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1alpha,HIF-1α)干扰寡核苷酸(siRNA)序列插入真核表达载体中,构建出特异性HIF-1α基因RNA干扰(RNAi)真核表达载体。采用组织块种植法,原代培养大鼠肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs),将构建出的特异性HIF-1αRNAi真核表达载体转染到PASMCs;分别在常氧和低氧下进行细胞培养,采用RT-PCR检测PASMCsHIF-1αmRNA表达水平,用MTT和流式细胞仪检测细胞增殖水平,探讨低氧条件下HIF-1αRNAi真核表达载体对PASMCs增殖的影响。结果表明,低氧培养48h后,正常PASMCs和转染了HIF-1αsiRNA阴性表达载体的细胞增殖显著,HIF-1αmRNA表达水平也显著升高;而转染了HIF-1αsiRNA阳性表达质粒的细胞增殖不显著,HIF-1αmRNA表达水平较低。结果提示:HIF-1αRNAi真核表达载体能显著干扰培养的PASMCsHIF-1αmRNA表达,同时抑制低氧环境下PASMCs的增殖。

关 键 词:肺动脉  平滑肌细胞  低氧诱导因子-1α  RNA干扰  细胞增殖
收稿时间:2005-07-12
修稿时间:2005-10-11

Effects of RNAi on hypoxia inducible factor-1alpha activity and proliferation of hypoxic pulmonary artery smooth muscle cells in rat
Zhang W,Cao Y,Zhang Y,Ma QS,Ma L,Ge RL.Effects of RNAi on hypoxia inducible factor-1alpha activity and proliferation of hypoxic pulmonary artery smooth muscle cells in rat[J].Acta Physiologica Sinica,2006,58(1):71-76.
Authors:Zhang Wei  Cao Yue  Zhang Yu  Ma Qi-Sheng  Ma Lan  Ge Ri-Li
Institution:Research Center for High Altitude Medicine, Qinghai University, Xining 810001, China. gerili@public.xn.qh.cn.
Abstract:
Keywords:
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