| 利用带有原核增强子样序列的新型载体在大肠杆菌中高效表达人α肿瘤坏死因子 |
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| 引用本文： | 张求旺,吴淑华,万晓余,张丽兰,张德震,梁希若,侯云德. 利用带有原核增强子样序列的新型载体在大肠杆菌中高效表达人α肿瘤坏死因子[J]. 病毒学报, 1992, 0(3) |
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| 作者姓名： | 张求旺 吴淑华 万晓余 张丽兰 张德震 梁希若 侯云德 |
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| 作者单位： | 广州医学院，中国预防医学科学院病毒学研究所病毒基因工程国家重点实验室，中国预防医学科学院病毒学研究所病毒基因工程国家重点实验室，中国预防医学科学院病毒学研究所病毒基因工程国家重点实验室，中国预防医学科学院病毒学研究所病毒基因工程国家重点实验室，广州医学院，中国预防医学科学院病毒学研究所病毒基因工程国家重点实验室 北京，北京，北京，北京，北京 |
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| 摘 要： | 将去除信号肽的人肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)cDNA插入到带有原核增强子样序列Px的新型表达载体pBV320中,使TNF cDNA 5′端直接置于大肠杆菌trp启动子下游,采用37℃恒温培养,使TNF在大肠杆菌中获得了高效表达,表达活性达1.35(±0.17)×10~6U/L菌液。表达的TNF-α对L929细胞的毒性作用可被抗人肿瘤坏死因子-α的单克隆抗体所中和。表达菌裂解液作SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,显示有一条分子量与TNF分子量吻合、约为17000道尔顿的蛋白带。利用DEAE-Sepharose阴离子交换层析及Sephacryl S-200凝胶过滤对上述重组人TNF-α进行纯化,获得电泳纯产品,比活性为1.48×10~6U/mg。
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| 关 键 词： | 肿瘤坏死因子 原核增强子样序列 蛋白质纯化 |
HIGH EXPRESSION OF A RECOMBINANT HUMAN TUMOR NECROSIS FACTOR ALPHA BY USING A NEW EXPRESSION VECTOR HARBORING A PROKARYOTIC ENHANCER SEQUENCE |
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| Zhang Qiuwang Wu Shuhua Wan Xiaoyu Zhang Lilan Zhang Dezhen Liang Xiruo Hou YundeNational Laboratory of Molecular Virology and Genetic Engineering. HIGH EXPRESSION OF A RECOMBINANT HUMAN TUMOR NECROSIS FACTOR ALPHA BY USING A NEW EXPRESSION VECTOR HARBORING A PROKARYOTIC ENHANCER SEQUENCE[J]. Chinese journal of virology, 1992, 0(3) |
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| Authors: | Zhang Qiuwang Wu Shuhua Wan Xiaoyu Zhang Lilan Zhang Dezhen Liang Xiruo Hou YundeNational Laboratory of Molecular Virology and Genetic Engineering |
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| Affiliation: | Zhang Qiuwang Wu Shuhua Wan Xiaoyu Zhang Lilan Zhang Dezhen Liang Xiruo Hou YundeNational Laboratory of Molecular Virology and Genetic Engineering,Institute of Virology,Chinese Academy of Preventive Medicine,Beijing |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Tumor necrosis factor Prokaryotic enhancer sequence Protein purification |
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