| 一种基于流式细胞术的牛多细胞因子检测方法 |
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| 引用本文： | 朱兆成,夏爱鸿,曹兆立,李昕,陈祥,徐正中,焦新安. 一种基于流式细胞术的牛多细胞因子检测方法[J]. 生物工程学报, 2023, 39(1): 347-358 |
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| 作者姓名： | 朱兆成 夏爱鸿 曹兆立 李昕 陈祥 徐正中 焦新安 |
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| 作者单位： | 扬州大学 江苏省人兽共患病学重点实验室/江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心, 江苏 扬州 225009;扬州大学 农业农村部农产品质量安全生物性危害因子(动物源)控制重点实验室, 江苏 扬州 225009 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划(2021YFD1800403);江苏省自然科学基金(BK20201432);江苏省农业科技自主创新资金项目[CX(21)1004];江苏省重点研发计划(现代农业) (BE2021331);江苏高校优势学科建设工程资助项目(PAPD) |
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| 摘 要： | 本研究旨在建立一种基于流式细胞术的牛多细胞因子检测方法。对前期制备并筛选出的针对牛细胞因子IFN-γ、IL-2、TNF-α、IP-10和MCP-1的单克隆抗体进行荧光标记,与细胞表面分子抗体组合搭配,进行牛多细胞因子流式检测方法的建立和优化。随后利用建立的方法进行BCG体外感染牛外周血单个核细胞的细胞因子表达规律测定,并结合CFP10-ESAT6蛋白刺激剂评价上述细胞因子作为牛结核诊断标识的潜力。建立的牛多细胞因子流式检测方法可以有效测定BCG感染牛外周血T淋巴细胞的细胞因子表达,其中IFN-γ、IL-2、TNF-α在感染40h后持续上升,而IP-10和MCP-1表达水平呈现下降趋势;对于牛外周血CD4+T淋巴细胞IFN-γ、IL-2、TNF-α的联合检测能有效区分牛结核阳性和阴性样品。这一方法为牛病原菌感染、疫苗注射后细胞免疫应答水平评价以及疫病诊断提供了重要技术手段。
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| 关 键 词： | 牛细胞因子 胞内染色 流式细胞术 细胞免疫应答 疫病诊断 |
| 收稿时间： | 2022-04-06 |
| 修稿时间： | 2022-06-22 |
Development of a flow cytometry method for detection of bovine multi-cytokines |
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| ZHU Zhaocheng,XIA Aihong,CAO Zhaoli,LI Xin,CHEN Xiang,XU Zhengzhong,JIAO Xin''an. Development of a flow cytometry method for detection of bovine multi-cytokines[J]. Chinese journal of biotechnology, 2023, 39(1): 347-358 |
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| Authors: | ZHU Zhaocheng XIA Aihong CAO Zhaoli LI Xin CHEN Xiang XU Zhengzhong JIAO Xin''an |
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| Affiliation: | Jiangsu Key Laboratory of Zoonosis/Jiangsu Co-Innovation Center for Prevention and Control of Important Animal Infectious Diseases and Zoonoses, Yangzhou University, Yangzhou 225009, Jiangsu, China;Key Laboratory of Prevention and Control of Biological Hazard Factors (Animal Origin) for Agrifood Safety and Quality, Ministry of Agriculture and Rural Affairs, Yangzhou University, Yangzhou 225009, Jiangsu, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | bovine cytokine intracellular staining flow cytometry cellular immune response disease diagnosis |
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