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硫氧还蛋白Lmo1903介导单增李斯特菌抵抗氧化应激的生物学功能研究
引用本文:陈雨吉,吕晓玲,韩月,罗平,曹启予,陈歆丹,吴宇康,徐加利,管迟瑜,宋厚辉,程昌勇.硫氧还蛋白Lmo1903介导单增李斯特菌抵抗氧化应激的生物学功能研究[J].微生物学报,2023,63(3):1269-1282.
作者姓名:陈雨吉  吕晓玲  韩月  罗平  曹启予  陈歆丹  吴宇康  徐加利  管迟瑜  宋厚辉  程昌勇
作者单位:浙江农林大学动物科技学院·动物医学院 动物健康互联网检测技术浙江省工程研究中心 浙江省动物医学与健康管理国际科技合作基地 中澳动物健康大数据分析联合实验室 浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室, 浙江 杭州 311300;宁波检验检疫科学技术研究院 宁波海关技术中心, 浙江 宁波 315100
基金项目:国家自然科学基金(31902280,31972648);宁波市自然科学基金(202003N4179);浙江农林大学学生科研训练项目(2021KX0120)
摘    要:【目的】以单增李斯特菌(Listeria monocytogenes, LM)硫氧还蛋白Lmo1903为研究对象,研究其在细菌环境适应过程中的抗氧化应激生物学作用。【方法】使用生物信息学方法分析Lmo1903的进化关系和关键活性位点,使用酶切连接的方法构建Lmo1903蛋白表达载体,获得纯化的重组蛋白,以胰岛素为底物分析其氧化还原酶学活性;同时制备鼠源多克隆抗体,分析其在细胞内的定位;采用核苷酸定点突变技术构建CX1X2C基序中的半胱氨酸点突变蛋白,分析关键位点半胱氨酸对Lmo1903酶活的影响;采用同源重组原理构建lmo1903基因缺失株Δlmo1903和回补株CΔlmo1903,研究lmo1903在单增李斯特菌生长、运动和抗氧化应激方面发挥的功能。【结果】生物信息学分析显示,Lmo1903含有CX1X2C基序,与枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)的TrxA的亲缘关系较近,属于硫氧还蛋白家族成员,主要定位在细菌细胞质中,具有较强的还原酶学活性,突变CX1X2C基序中的半胱氨酸残基会显著降低Lmo1903的还原酶活能力。缺失lmo1903不影响单增李斯特菌的生长能力,但显...

关 键 词:单增李斯特菌  硫氧还蛋白  细胞定位  氧化应激  运动性
收稿时间:2022/8/2 0:00:00

The thioredoxin Lmo1903 contributes to oxidative stress tolerance of Listeria monocytogenes
Institution:Key Laboratory of Applied Technology on Green-Eco-Healthy Animal Husbandry of Zhejiang Province, China-Australia Joint Laboratory for Animal Health Big Data Analytics, Zhejiang Provincial Engineering Research Center for Animal Health Diagnostics & Advanced Technology, Zhejiang International Science and Technology Cooperation Base for Veterinary Medicine and Health Management, College of Animal Science and Technology/College of Veterinary Medicine, Zhejiang A&F University, Hangzhou 311300, Zhejiang, China;Technical Center of Ningbo Customs, Ningbo Academy of Quarantine & Inspection Science and Technology, Ningbo 315100, Zhejiang, China
Abstract:
Keywords:Listeria monocytogenes  thioredoxin  cellular localization  oxidative stress  motility
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