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大肠杆菌胞内半胱氨酸响应型启动子的筛选表征
引用本文:刘雪琪,傅雅雯,李鲁华,杨套伟,饶志明.大肠杆菌胞内半胱氨酸响应型启动子的筛选表征[J].微生物学报,2023,63(3):1204-1216.
作者姓名:刘雪琪  傅雅雯  李鲁华  杨套伟  饶志明
作者单位:江南大学生物工程学院 工业生物技术教育部重点实验室, 江苏 无锡 214122
基金项目:国家重点研发计划(2021YFC2100900);江苏省自然科学基金(BK20221537)
摘    要:【目的】半胱氨酸是一种重要的含硫氨基酸,广泛应用于化妆品、药品、食品等行业,微生物发酵法合成半胱氨酸已成为当前研究的热点。基于比较转录组学分析等技术,筛选并表征大肠杆菌(Escherichia coli)胞内对半胱氨酸浓度变化显著响应的启动子。【方法】在Escherichia coli W3110培养基中外源添加不同终浓度的半胱氨酸,通过比较转录组学分析筛选转录水平显著响应半胱氨酸浓度变化的基因,融合目标基因的启动子片段与荧光报告基因egfp构建启动子文库,进一步测定不同半胱氨酸浓度条件下,含有不同启动子重组菌的绿色荧光蛋白(greenfluorescent protein, GFP)荧光强度。【结果】筛选并挖掘了随着半胱氨酸浓度提高而转录水平显著提升的27个基因,并将基因的潜在启动子片段与荧光报告基因egfp融合构建启动子文库,筛选获得对半胱氨酸变化具备特异性响应的启动子PE2。最后,对PE2启动子-35区间隔区域AAAT进行随机突变,最终获得在1-7g/L半胱氨酸浓度范围内特异性响应性能显著提高的启动子PE2-33。...

关 键 词:大肠杆菌  半胱氨酸  启动子  响应型
收稿时间:2022/7/20 0:00:00

Screening and characterization of cysteine responsive promoters from Escherichia coli
LIU Xueqi,FU Yawen,LI Luhu,YANG Taowei,RAO Zhiming.Screening and characterization of cysteine responsive promoters from Escherichia coli[J].Acta Microbiologica Sinica,2023,63(3):1204-1216.
Authors:LIU Xueqi  FU Yawen  LI Luhu  YANG Taowei  RAO Zhiming
Institution:Key Laboratory of Industrial Biotechnology of Ministry of Education, School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi 214122, Jiangsu, China
Abstract:
Keywords:Escherichia coli  cysteine  promoter  response
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