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人CD147的克隆表达及其对成纤维细胞基质金属蛋白酶表达的影响
引用本文:封青川,陈思娇,宋今丹.人CD147的克隆表达及其对成纤维细胞基质金属蛋白酶表达的影响[J].细胞生物学杂志,2006,28(6):844-848.
作者姓名:封青川  陈思娇  宋今丹
作者单位:中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室 沈阳110001(封青川,宋今丹),中国医科大学附属第一医院老年病教研室 沈阳110001(陈思娇)
基金项目:辽宁省教育厅(No.051949),辽宁省自然科学基金(No.20062102)资助项目~~
摘    要:CD147可以促进基质金属蛋白酶(MMPs)的表达,与肿瘤的生长和浸润有关。为了研究CD147在大肠癌中的作用,利用RT-PCR从一健康人克隆了cd147基因,测序发现该基因存在两个碱基突变,其中C634T造成了CD147跨膜区212位氨基酸由L突变为F。分别构建CD147的原核(pGEX-5x-147)和真核(pEGFP-147)表达系统,在宿主菌BL21和CCL229细胞中均获得了稳定表达。Western印迹显示原核表达产物比真核CD147分子量小,说明原核CD147缺乏糖基化。荧光显微镜显示真核CD147表达定位于CCL229细胞膜,表明突变L212F不影响CD147的膜定位。用明胶电泳检测表达的CD147对MMPs表达的影响,结果显示原核产物不能诱导MMPs表达上调,而真核产物能够明显诱导MMPs表达上调,说明糖基化对于CD147活性是必需的,真核系统能够表达具有生物功能的CD147,并且突变L212F不会影响蛋白质的活性。

关 键 词:CD147  基质金属蛋白酶  基因克隆  基因表达
收稿时间:2006-03-27
修稿时间:2006-06-29

Cloning, Expression of Human CD147 and Its Effect on Matrix Metalloproteinases Expression of Fibroblast
Qing-Chuan Feng,Si-Jiao Chen,Jin-Dan Song.Cloning, Expression of Human CD147 and Its Effect on Matrix Metalloproteinases Expression of Fibroblast[J].Chinese Journal of Cell Biology,2006,28(6):844-848.
Authors:Qing-Chuan Feng  Si-Jiao Chen  Jin-Dan Song
Institution:1Department of Cell Biology, College of Basic Medical Sciences, China Medical University, Shenyang 110001, China; 2Teaching and Research Office for Geriatric Disease of the First Affiliated Hospital of China Medical University, Shenyang 110001, China
Abstract:
Keywords:CD147  matrix metalloproteinases  gene cloning  gene expression  
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