发根农杆菌介导的尾巨桉遗传转化体系的建立

发根农杆菌（Agrobacterium rhizogenes）的建立对植物功能基因的验证具有重要意义，为了在桉树（Eucalyptus）中建立发根农杆菌介导的遗传转化体系，本研究以不同的发根农杆菌菌株侵染尾巨桉（Eucalyptus urophylla × E. grandis）的叶片和茎段，确定合适的农杆菌菌株和外植体类型，在此基础上开展农杆菌浓度、侵染时间对毛状根诱导的影响。结果表明：采用发根农杆菌菌株MSU440，以叶片为外植体进行发根诱导，最高获得了81.0%的毛状根诱导率，毛状根平均根长达到3.23 cm。在发根农杆菌浓度为OD₆₀₀=0.3、侵染时间为30 min时，共培养48 h后经过20 mg·L^-1卡那霉素筛选培养，通过PCR分子鉴定和GUS染色证实外源基因稳定地整合在桉树毛状根基因组中，转化率达20.2%。初步建立了发根农杆菌介导的桉树遗传转化体系，为桉树基因功能鉴定和进一步的转基因育种奠定基础。